ENSAYOS

ENZIMAS:ESTRUCTURA, CLASIFICACION,FUNCION, ACTIVIDAD, CINETICA E INHIBICION ENZIMATICA,COENZIMAS, VITAMINAS Y METALES ESENCIALES, REGULACION DE LA ACTIVIDAD ENZIMATICA
ESTRUCTURA
La gran mayoría de las enzimas son proteínas.
Sin embargo existen algunos ARN que pueden actuar como enzimas (ribozimas)
¿Cuál es la estructura de un aminoácido?
Todos los aminoácidos están formados por un grupoamino y un grupo carboxilo.
Los enlaces peptídicos conectan los aminoácidos formando cadenas lineales
CLASIFICACION
1) OXIDOREDUCTASAS: Catalizan reacciones de oxidoreducción. Asociadas a coenzimas
Comprenden :
Deshidrogenasas: el sustrato dona hidrógenos y los acepta la coenzima.
Oxidasas : Aceptor de hidrógeno es el oxígeno
Peroxidasas: Utilizanel H₂O₂ para oxidar el sustrato
Oxigenasas: Incorporan oxígeno al sustrato
EJEMPLO: lactato deshidrogenasa
3) HIDROLASAS: Ruptura de enlaces C-O, C-N, C-S y O-P por adición de agua. Arginasa.
4) LIASAS: Ruptura de uniones C -C, C-S y C-N , exncluyendo uniones peptídicas. Aldolasa
5) ISOMERASAS :Interconvierten isómeros de cualquier tipo , ópticos, geométricos o de posición.Triosafosfato isomerasa
6) LIGASAS: Catalizan uniones entre C-C ,C-S, C-O o C-N. Glutamina sintetasa
Funciones de las Enzimas.
Las enzimas cumplen funciones de :
1. Catálisis. La mayoría de las reacciones químicas del metabolismo son lentas, las enzimas aceleran las reacciones permitiendo que el metabolismo se efectúe a la velocidad que las células requieren.
2. Dirección. Las enzimas no permitenla formación de productos secundarios, de esta manera evitan que se pierdan precursores y energía que la célula necesita; esta característica también se conoce como catálisis negativa.
3. Control. La actividad de las enzimas se puede regular para ajustarla a las necesidades del metabolismo.
La velocidad del metabolismo es determinada por las enzimas.
ACTIVIDAD ENZIMATICA
Puede determinarsemediante la cantidad de producto formado, o de sustrato
Se mide la velocidad inicial (20%)
Cantidad de enzima se indica en UI
Unidad de cualquier enzima es la cantidad que cataliza la transformación de un micromol (μmol= 10⁻⁶) de sustrato por minuto
CINETICA E INHIBICION ENZIMATICA
CINETICA ENZIMATICA
La cinética enzimática estudia el mecanismo, velocidad y los factores que modifican lasreacciones catalizadas por enzimas.
CINETICA
A) CONCENTRACION DE ENZIMA. Cuando se determina la velocidad inicial, se puede establecer la relación entre cantidad de enzima y velocidad (equivalente a actividad enzimática). La velocidad es directamente proporcional a la concentración de enzima.
B) CONCENTRACION DE SUSTRATO.
E + S ES E +P
ECUACIÓN DE MICHAELIS-MENTENVmax [S]
V0 = ---------------
KM + [S]
C)TEMPERATURA
La velocidad de muchas reacciones biológicas se duplican por cada 10⁰C de aumento de temperatura.
Para la gran mayoría de enzimas , la temperatura óptima esta alrededor de 37 ⁰C
Alrededor de los 60⁰C se inactivan las enzimas
D) pH
Para la mayoría de enzimas, la actividad optima se encuentra entre pH 6 y 8.
Hay algunasexcepciones:
pepsina del jugo gástrico pH alrededor de 1.5
Fosfatasa ácido pH 5
Fosfatasa alcalina pH 9.5
INHIBICION ENZIMATICA
INHIBIDORES IRREVERSIBLES.
Producen cambios permanentes en la mólecula de enzima, con deterioro definitivo de su capacidad catalítica
Venenos organoforados – acetilcolinesterasa , enzima muy importante en el sistema nervioso.Inhibidores suicidas .Ejemplo Alopurinol, inhibidor de la xantina oxidasa , utilizada en el tratamiento de la gota.
INHIBIDORES REVERSIBLES
1)INHIBIDORES COMPETITIVOS
a)El inhibidor presenta similitud estructural con el sustrato y ambos compiten por el sitio activo de la enzima.
b) Se unen al sitio activo de la enzima a pesar que no presentan similitud estructural con el sustrato. Ejemplo....