enzimas de restriccion

¿Quién, dónde y cómo se descubrieron las enzimas de reducción?
Las enzimas de reducción o endonucleasas de reducción fueron descubiertas entre la década de los 60’s y 70’s por Daniel Nathans y Hamilton O. Smith en Basilea, luego de investigar la biología molecular en la Universidad de Míchigan. Estas enzimas fueron descubiertas en microorganismos. De hecho, se encuentran sólo en organismosprocariotas (bacterias). Por esto, se les dio una nomenclatura asociada al organismo de donde provienen.

¿Cuántas enzimas de restricción existen? ¿Hay categorías? Criterios para organización de estas enzimas:
Se han encontrado más de 3800 enzimas de restricción que solo 600 pueden adquirirse comercialmente.
Las endonucleasas de restricción se clasifican en 3 tipos que se dividen en doscategorías, en una de las categorías entran las que realizan cortes “parejos” o extremos rotos y en esta categoría entran las enzimas de tipo 2, cuyas características son:
Solo cortan.
Cortan de manera consistente dentro de la secuencia que reconocen.
No necesitan ATP.
Mientras que las de tipo 1 y tipo 3 entran en la categoría “de corte disparejo” o extremos cohesivos y sus características son:Pueden realizar cortes y modificaciones.
Cortan a cierta distancia de la secuencia de reconocimiento, las de tipo 1 cortan lejos de esta secuencia ya se abajo o arriba, mientras que las de tipo 3 cortan de 5-8 bases antes o después de la secuencia de reconocimiento.
Requieren ATP para moverse a través del ADN.












A su vez las enzimas de restricción pueden realizan dos tipos decortes, la primer forma son los cortes cohesivos o pegajosos los cuales cortan de manera escalonada en dos puntos diferentes y la segunda forma que son los cortes abruptos los cuales solo cortan en un punto.
Ejemplo:
Cortes cohesivos:
GAATTC GGATCC AAGCTT
CTTAAG CCTAGG AACGAA
EcoRIBamHI Hindlll

Cortes abruptos:
AATATT CCCGGG
TTATAA GGGCCC
Sspl Smal

¿Quién utiliza las enzimas de restricción y bajo qué propósitos?
Son utilizadas por médicos e investigadores para el tratamiento de enfermedades genéticas como la fibrosis quística, hemofilia,que son causadas por genes defectuosos o ausentes, también es utilizada por el FBI para la detección de huellas.
Las aplicaciones de las enzimas de restricción radican en las investigaciones en la biología molecular y en técnicas de biotecnología moderna como las siguientes:
Hacer un mapa de restricción de un plásmido o bacteriófago, es decir, el ADN se corta con varias enzimas de restricción,solas y en parejas para saber el número de sitios de corte y sus posiciones relativas en la molécula, el orden y la distancia entre ellos.
Fragmentar el ADN para separación por electroforesis. Los fragmentos obtenidos se pueden separar en tamaños mediante la técnica de electroforesis y así poderlos estudiar.
Generación de fragmentos para ser clonados y crear ADN recombinante, es decir, se puedecortar una molécula de ADN con una enzima y con el mismo tipo de enzima cortar el fragmento de interés que nos interesa para clonarlo.



¿Cómo son fabricadas las enzimas de restricción, ¿quién las fabrica? y ¿cómo?
Las enzimas de restricción se extraen de bacterias, estas bacterias usan las enzimas para defenderse de ADN externo, cada especia de bacteria tiene preferencia por tener en sugenoma determinados tipos de secuencias. Si entra en su citoplasma un ADN de otra especia, tendrá preferencia por secuencias distintas, luego cortará el ADN en una secuencia que ella no posee, pero el ADN de otras especias si lo tendrá. Son fabricadas en laboratorios y distribuidas por los proveedores mencionados en este documento.
Las enzimas de restricción se extraen de bacterias, estas...