Espectrofotometría
FACULTAD DE CIENCIAS QUÍMICAS Y FARMACIA
ESCUELA DE QUÍMICA BIOLÓGICA
DEPARTAMENTO DE BIOQUÍMICA
Curso: Bioquímica I
ESPECTROFOTOMETRÍA
Fecha:29/01/2010
INTRODUCCIÓN
La espectrofotometría es el método de análisis óptico más utilizado en las investigaciones químicas y biológicas. El espectrofotómetro es un instrumento que permite comparar laradiación absorbida o transmitida por una solución que contiene una cantidad desconocida de soluto, y una que contiene una cantidad conocida de la misma sustancia. Las ventajas de la espectrofotometríasobre otros métodos analíticos son varias: es rápida, precisa, versátil, fácil de usar y eficiente en costo. De esta forma se puede determinar el espectro de absorción (luz absorbida en función de lalongitud de onda) e identifica la sustancia o molécula. Y determinar la concentración de una muestra con base a la curva de calibración y la ecuación encontrada (y = a + bx).
METODOLOGÍA
Laabsorción de una disolución de CoCl2 0.2 M en HCl 1%, se determina por medio de un espectrofotómetro, colocando la disolución en una cubeta para luego detectar la cantidad de luz absorbida. Seselecciona el dato que indique la mayor energía de absorción y luego este dato se utiliza para realizar la curva de calibración, por medio de diferentes concentraciones de disoluciones de CoCl2, que permitenconocer la concentración de una muestra problema.
RESULTADOS
Tabla No. 1 “Determinación del espectro de absorción”
|Determinación |λ (nm)*|Absorbancia |
|1 |400nm |0.063 |
|2|420nm |0.122 |
|3 |440nm |0.292...
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