espectrometria

Espectrometría de masa
Aplicaciones

Facultad de Ciencias Exactas y Naturales
UBA

Espectrometría de masa
Aplicaciones
- Cuantificación
- Determinación de fórmula molecular (isótopos)
- Estudio del metabolismo de drogas
- Estudios clínicos
- Elucidación estructural de productos naturales
- Estudio de mecanismos de reacciones
- Imágenes
Facultad de Ciencias Exactas y Naturales
UBAAplicaciones

Cuantificación por EM
Poder correlacionar intensidad de señal vs cantidad

Especificidad
(conviene usar iones de m/z alta)
-Métodos aplicados sobre la muestra

Purificación previa
Derivatización

-Métodos aplicados sobre el equipo

Aumento de la resolución
Uso técnicas de ionización
selectivas
SIM o SRM

Facultad de Ciencias Exactas y Naturales
UBAAplicaciones

Cuantificación por EM
Poder correlacionar intensidad de señal vs cantidad

Sensibilidad y límite de detección
(conviene usar iones de AR alta)
- Elección de modo positivo-negativo
- Elección de la técnica de ionización
- Tiempo de lectura de la señal (adquisición de datos): scan, SIM, SRM

Facultad de Ciencias Exactas y Naturales
UBA

Aplicaciones

Cuantificación por EMEstándar externo
Mx = Ix MI / II

y

Mx = Ix RF

Errores: variación en las condiciones de la fuente, inestabilidad de la escala de
masa

Estándar interno (para cada compuesto a analizarse)
• Análogos estructurales (marcados con isótopos estables)
• Homólogos
• Compuestos de la misma familia
(si hay separación previa pueden ser de igual PM!)

Facultad de Ciencias Exactas y NaturalesUBA

Aplicaciones

Cuantificación por EM

m/z 139/141
O

HOO

O

Cl
PM 152

141

Facultad de Ciencias Exactas y Naturales
UBA

PM 172/174

Aplicaciones

Cuantificación por EM
Estándar interno: Método de dilución isotópica
I

I
Qo

Sustancia
natural

Pm
Po

Sustancia
marcada

Qm
m

o

m/z

m

o

m/z

I
Sustancia natural +
sustancia marcadaR = N Pm + M Qm
N Po + M Qo

N

m

o

Facultad de Ciencias Exactas y Naturales
UBA

m/z

Espectrometría de masa
Aplicaciones
- Cuantificación
- Determinación de fórmula molecular (isótopos)
- Estudio del metabolismo de drogas
- Estudios clínicos
- Elucidación estructural de productos naturales
- Estudio de mecanismos de reacciones
- Imágenes
Facultad de Ciencias Exactasy Naturales
UBA

Aplicaciones

Determinación de fórmula molecular
Identificación del ingrediente activo de una droga falsificada
RCM 2003, 17, 215-221

N

Droga supuesta: halofantrina (HalfanTM), PM 500.43
antimalárico

HO
Cl

F

Cl
F

(M + H)+
(M + Na)+

(2M + H)+ (2M + Na)+

Espectro ESI de la Facultad de Ciencias Exactas y NaturalesHalfan
droga extraída del supuestoUBA

F

Aplicaciones

Determinación de fórmula molecular
Identificación del ingrediente activo de una droga falsificada
RCM 2003, 17, 215-221

Para 279.0890 u hay 45 FM posibles con C, H, N, O, F y S y dentro de 5 mu

Análisis de fragmentos con alta resolución-precisión

Espectro ESI MS/MS del ion m/z 279
Facultad de Ciencias Exactas y Naturales
UBA

AplicacionesDeterminación de fórmula molecular
Identificación del ingrediente activo de una droga falsificada
RCM 2003, 17, 215-221

Para 279.0890 u hay 45 FM posibles con C, H, N, O, F y S y dentro de 5 mu

Análisis de fragmentos con alta resolución-precisión
Ej. m/z 81.0437
m/z 92.0485

C4H5N2 (DBE= 3.5)

o CH6N2OF

C6H6N (DBE= 4.5) , CH6N3O2 (DBE= 0.5),
C3H10NS (DBE= -0.5), C3H7NF (DBE= 0.5)

…Posibles FM: 9 (la molécula tiene por lo menos 2N, 1O, 6C y 4 insat)
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UBA

Aplicaciones

Determinación de fórmula molecular
Identificación del ingrediente activo de una droga falsificada
RCM 2003, 17, 215-221

AR del (M+H+1)+ es 14.1%

nº C entre 10 y 15

FM = 4 (sólo una con S)
C12H12N4O3F
C15H11N4O2
C12H15N4O2S
C10H11N6O4

Patrón...