esterilizacion y asepcia

ESTERILIZACIÓN Y PREPARACIÓN DE MEDIOS DE CULTIVOObjetivos:
Identificar las principales técnicas de esterilización, desinfección y antisepsia en el laboratorio.
Conocer los diferentes medios de cultivo y su preparación.
ESTERILIZACIÓN Y DESINFECCIÓN
Introducción:La esterilización tiene como objeto la destrucción de los microorganismos, incluyendo formas resistentes como esporas,capsulas, virus y hongos. Es importante recordar que para cualquier procedimiento en el laboratorio se requiere un ambiente libre de agentes patógenos y contaminantes, tanto para garantizar resultados confiables como para proteger la salud del operador. Algunos métodos de esterilización son:
Calor húmedo: el objeto es la destrucción de los microorganismos por coagulación de las proteínas celulares. Elprincipal método es la esterilización por vapor a presión, esta se lleva a cabo en una autoclave, equipos que emplean vapor de agua saturado, a una presión de 15 libras y que alcanzan una temperatura de 121º C. Existen protocolos dependiendo del tipo de material que se quiere esterilizar, donde varían los tiempos y la temperatura. Generalmente para material limpio se utiliza entre 10 y 15minutos y para material contaminado se utiliza de 30 a 40 minutos.
Calor seco: La destrucción de los microorganismos se produce por oxidación de sus componentes celulares. Dentro de este se contemplan métodos como: aire caliente, llama directa e incineración.
Filtración: utilizando filtros de partículas de alta eficiencia (HEPA).
Rayos ultravioleta o radiación ionizante: Los rayos ultravioleta sonaltamente mutagénicos, causan alteraciones en el DNA. Las radiaciones ionizantes producen iones y radicales libres que alteran las bases de los ácidos nucleicos, estructuras proteicas y estructuras para la viabilidad de los microorganismos.
Esterilizante gaseoso: ejemplo óxido de etileno, formaldehído gaseoso, peróxido de hidrogeno. Son agentes alquilantes funcionan por medio de tres mecanismosdiferentes, los cuales todos alcanzan el mismo resultado - la interrupción de la función del ADN y la muerte celular.
Esterilizantes químicos: como el ácido paracético y el glutaraldehido. Agentes con actividad oxidante; cuya actividad se relaciona con la alquilación de componentes celulares alterando la síntesis proteica de los ácidos ADN Y ARN.
La desinfección es un procedimiento que buscaeliminar patógenos utilizando métodos químicos y físicos, aunque los más resistentes pueden sobrevivir. Se conocen tres grados de desinfección:
Desinfectante de grado alto: mata patógenos microbianos, tiene un eficiencia semejante a la esterilización, pero hay algunas formas resistentes como microorganismos formadores de esporas. Ejemplos: calor húmedo, glutaraldehido, peróxido de hidrogeno,compuestos clorados entre otros.
Desinfectante de grado medio: erradica microorganismos patógenos, con excepción de endosporas bacterianas. Ejemplos: alcoholes, compuestos yodados entre otros.
Desinfectante de grado bajo: mata la mayoría de bacterias en estado vegetativo y virus de tamaño intermedio y con envoltura lipídica. Ejemplos: compuestos de amonio cuaternario.
Antisepsia es un procedimientoen caminado a combatir y prevenir las infecciones ocasionadas por microbios; pero este término se reserva para agente que se aplican en tejidos vivos. Los antisépticos se utilizan para reducir el número de microorganismos patógenos presentes en la superficie cutánea. Algunos de los compuestos utilizados son: alcoholes, compuestos yodados, clorhexidina entre otros.
PREPARACIÓN DE MEDIOS DECULTIVOS
Un medio de cultivo es un conjunto de nutrientes, factores de crecimiento y otros componentes que crean las condiciones necesarias para el desarrollo de los microorganismos. Puesto que la diversidad metabólica de los microorganismos es enorme, la variedad de medios de cultivo es también muy grande. La mayoría de los medios de cultivo se comercializan en forma de liofilizados que es preciso...