Estudio de algunas propiedades físicas de los ácidos nucleicos extraídos de una muestra de hígado de pollo mediante pruebas de reconocimiento

REPÚBLICA BOLIVARIANA DE VENEZUELA
UNIVERSIDAD PEDAGÓGICA EXPERIMENTAL
LIBERTADOR
INSTITUTO PEDAGÓGICO DE CARACAS
CURSO: BIOQUÍMICA

ESTUDIO DE ALGUNAS PROPIEDADES FÍSICAS DE LOS ÁCIDOS NUCLEICOS EXTRAÍDOS DE UNA MUESTRA DE HÍGADO DE POLLO MEDIANTE PRUEBAS DE RECONOCIMIENTO

Autor: Daniel Rios A.Caracas, Enero de 2009
INTRODUCCIÓN

El ADN es la molécula principal para la perpetuación de la vida sobre la tierra. Compuesta por timina, desoxirribosa y ácido fosfórico, se encuentran unidos a proteínas histonicas por medio de fuerzas electroestáticas, formando conjuntos denominados Cromatinas. Estas cromatinas pueden desprenderse del núcleo celular por medio dedisoluciones fisiológicas de NaCL, y ser dispersadas por medio del detergente ionico Dodecil Sulfato de Sodio (SDS).
La molécula de ADN puede sufrir cambios significativos en su estructura al desnaturalizarse, por medio de la acción de pH extremos, aumento de la temperatura, exposición a solventes polares, etc. La desnaturalización hace que disminuya su viscosidad, al deformar la doble hélicedel ADN.
Su insolubilidad frente a solventes polares como los alcoholes, hacen posible que pueda observase suspendido y formar hebras al ser recogido con una varilla.

OBJETIVO GENERAL

- Estudiar algunas de las propiedades físicas de los ácidos nucleicos extraídos de una muestra de pollo mediante pruebas de reconocimiento.

OBJETIVOS ESPECÍFICOS

- Aislar los ácidos nucleicoscontenidos en una muestra de hígado de pollo, por medio de Dodecil Sulfato de Sodio (SDS) y NaClO4.

- Extraer los ácidos nucleicos presentes en la muestra mediante la desnaturalización de las proteínas aisladas con Cloroformo y posterior centrifugación.

- Reconocer el tipo de azúcar presente en el acido nucleico, por medio de la prueba de Bial y la prueba de Dische.
- Examinar la variación de laviscosidad del ADN obtenido en función de la temperatura, por medio de la prueba directa de conteo de gotas.

- Examinar la solubilidad del ADN obtenido en presencia de Etanol

METODOLOGÍA

Pesar el hígado de pollo (2g aproximadamente).

Triturar la muestra de hígado y mezclar con 3ml de NaCl al 9%

Centrifugar la muestra a máxima velocidad durante 10 minutos para obtener la CromatinaSobrenadante Precipitado

Descartar Adicionar un volumen igual al
homogeneizado original de SDS al
2%,para dispersar la cromatina


Agitar hasta obtener una muestra uniforme

Anadir NaClO4 hasta hacer la suspensión 1M
con respecto a este compuestoAgregar un mismo volumen de la mezcla
cloroformo-alcohol isoamilico 24/1

Agitar la mezcla con una varilla de vidrio
previamente sumergida en agua fría por 10 minCentrifugar la muestra a máxima velocidad
durante 10 minutos


Descartar las capas intermedias (proteínas Separar cuidadosamente la fase
desnaturalizadas) e inferior cloroformo acuosa (capa superior)...