Exposicion cromatografia

Resumen
Se validó el método de la Association of Official Analytical Chemist (AOAC) para la determinación de patulina en jugo de manzana por cromatografía líquida de alta presión (HPLC) con detector ultravioleta a 275 nm y una columna RP18, para jugo de manzana y puré de frutas. Se empleó como fase móvil una mezcla al 10 % acetonitrilo-agua con una velocidad de flujo de 2,7 mL/min. La patulinapresentó un tiempo de retención de 14,8 ± 0,3 min. La ecuación de regresión fue Y = 1952,5X + 1673,5 y el coeficiente de correlación lineal de 0,9991. Se obtuvo un recobrado medio del 82,51 % y un coeficiente de variación del 3,33 % para los niveles de contaminación ensayados. La repetibilidad de una muestra contaminada con 33 µg/L de patulina fue de 3,12 µg/L. Se estableció para los jugos ellímite de detección en 1,72 µg/L y el de cuantificación en 5,2 µg/L. Los purés de frutas fueron previamente diluidos y centrifugados, proponiéndose para el mango una purificación adicional por columna. Fue diseñado un control de calidad interno para el procesamiento de las muestras.
DeCS: PATULINA; CROMATOGRAFIA LIQUIDA DE ALTA PRESION; ANALISIS DE REGRESIÓN.
 
La patulina es una micotoxinaproducida como metabolito secundario por un gran número de hongos de los géneros Penicillium y Aspergillus, entre los que se encuentra incluido el P. expansum. Se le confiere alta toxicidad para células de plantas y animales. Presenta carácter hepatotóxico, nefrotóxico e inmunotóxico. Aunque su carcinogenicidad no ha sido demostrada, los expertos proponen continuar los estudios en animales deexperimentación en especies de no roedores.
La patulina puede detectarse en frutas, hortalizas, cereales enmohecidos y piensos, no obstante, no puede excluirse la presencia de esta micotoxina en las frutas aparentemente sanas. El grado de contaminación está relacionado con el grado de podredumbre y la patulina apenas se extiende fuera de los tejidos alterados; por consiguiente, la exposición humana no esposible sino a partir de frutas elaboradas.1,2
Estudios realizados en diferentes países indican una moderada a alta incidencia de patulina, particularmente en productos de manzana, aunque los niveles de contaminación son generalmente bajos. Ocasionalmente, altas concentraciones de patulina se han encontrado, alcanzando 1 000 mg/L o más. Varios países han establecido un límite regulatorio de 50 mg/L,valor que recomienda la Organización Mundial de la Salud.
Varios métodos analíticos han sido publicados entre los que se encuentran la cromatografía de capa delgada3-5 con revelado de color, la cromatografía de gases con agentes derivatizantes y más recientemente la cromatografía líquida de alta presión (HPLC) con detector UV o arreglo de diodo.6,7
El objetivo de este trabajo fue establecer yvalidar un método de análisis de patulina en jugos y compotas de manzanas por HPLC con detección ultravioleta.
Métodos
Se realizó la validación del método oficial de la Association of Official Analytical Chemists (AOAC) para la determinación de patulina en jugo de manzana por HPLC,6 según los principios del Codex.
Este método es aplicado para la detección y cuantificación de patulina en jugo demanzana y fue extrapolado a otras matrices como puré de peras y mango. La patulina fue extraída con acetato de etilo y purificada por partición en una solución de carbonato de sodio. La muestra extraída se secó con sulfato de sodio anhidro.
Después de evaporar el acetato de etilo, la patulina se redisolvió en 300 mL de fase móvil (10 % acetonitrilo-agua). Para laidentificación y cuantificación seinyectaron 20 mL de extracto en un cromatógrafo líquido de alta presión Knauer, con una bomba isocrática de doble pistón acoplado a un detector Shidmazu UV-visible modelo SPD-6AV y un integrador Shidmazu modelo C R6A Chromatopac. Se empleó una columna cromatográfica de 25 cm x 4 mm, rellena con Spherisol C18 de 100 A° y 5 mg de tamaño de partícula. La columna se almacenó con el 80 % de...