Expresión del gen de la capside del virus huasteco del chile en un sistema de baculovirus
Páginas: 3 (650 palabras)
Publicado: 5 de febrero de 2015
Universidad Autonoma de Sinaloa.
Facultad de Ciencias Químico Biologicas
Lic. En Biotecnología Genómica
Biología Molécular.
Dr. Victor M. Gonzalez.
Ensayo:Expresión del Gen de la Proteína de la cápside del Virus Huasteco del Chile en un Sistema de Baculovirus
José Antonio Cruz Cárdenas.
Expresión del Gen de la Proteína dela cápside del Virus Huasteco del Chile en un Sistema de Baculovirus
Los geminivirus son catalogados como un grupo de Fitopatógenos , son virus pequeños que poseen un genoma de DNA circular decadena sencilla , con un tamaño de 2.5-5 Kilobases y una cápside germinada. La identificación de ese grupo de Fitopatógenos se ha enfocado hacia la aplicación de estrategias moleculares como PCR,análisis southern, entre otros.
Debido a la existencia de dificultades para la detección de geminivirus en plantas. Se utilizo el sistema de expresión de Baculovirus para expresar el gen de la proteína dela cápside (PC) del virus huasteco del chile (PHV), con la finalidad de obtener anticuerpos policlónales específicos contra la PC-PHV. Las regiones codificantes de 800 pares de bases del PHV se clonobajo el promotor de la proteína P10 del virus de poliedrosis nuclear de Autographa Californica en el vector de transferencia pAcUW31.
Para la obtención del sistema de Baculovirus recombinante seutilizo una cepa derivada del VPNAc denominado BacPAK6 la cual tiene escindida la secuencia codificante el gen de la poliedrina. Se utilizo una línea celular especifica de insectos derivada deSpodoptera frugiperda Smith y esta se mantuvo en medio TC-100 suplementando con 10% de FBS a 28ºC, utilizando frascos de cultivo de células de 25 Cm2 .
Debido a la carencia de sitios de restricciónapropiados para escindir el gen completo de la PC-PHV, este se subclono por PCR, a partir de la secuencia completa del componente A del PHV clonado previamente en el plásmido plHV22.
Subclonación de...
Universidad Autonoma de Sinaloa.
Facultad de Ciencias Químico Biologicas
Lic. En Biotecnología Genómica
Biología Molécular.
Dr. Victor M. Gonzalez.
Ensayo:Expresión del Gen de la Proteína de la cápside del Virus Huasteco del Chile en un Sistema de Baculovirus
José Antonio Cruz Cárdenas.
Expresión del Gen de la Proteína dela cápside del Virus Huasteco del Chile en un Sistema de Baculovirus
Los geminivirus son catalogados como un grupo de Fitopatógenos , son virus pequeños que poseen un genoma de DNA circular decadena sencilla , con un tamaño de 2.5-5 Kilobases y una cápside germinada. La identificación de ese grupo de Fitopatógenos se ha enfocado hacia la aplicación de estrategias moleculares como PCR,análisis southern, entre otros.
Debido a la existencia de dificultades para la detección de geminivirus en plantas. Se utilizo el sistema de expresión de Baculovirus para expresar el gen de la proteína dela cápside (PC) del virus huasteco del chile (PHV), con la finalidad de obtener anticuerpos policlónales específicos contra la PC-PHV. Las regiones codificantes de 800 pares de bases del PHV se clonobajo el promotor de la proteína P10 del virus de poliedrosis nuclear de Autographa Californica en el vector de transferencia pAcUW31.
Para la obtención del sistema de Baculovirus recombinante seutilizo una cepa derivada del VPNAc denominado BacPAK6 la cual tiene escindida la secuencia codificante el gen de la poliedrina. Se utilizo una línea celular especifica de insectos derivada deSpodoptera frugiperda Smith y esta se mantuvo en medio TC-100 suplementando con 10% de FBS a 28ºC, utilizando frascos de cultivo de células de 25 Cm2 .
Debido a la carencia de sitios de restricciónapropiados para escindir el gen completo de la PC-PHV, este se subclono por PCR, a partir de la secuencia completa del componente A del PHV clonado previamente en el plásmido plHV22.
Subclonación de...
Leer documento completo
Regístrate para leer el documento completo.