Extracción De Adn

OBJETIVOS
Conocer y entender los principios básicos para poder extraer ADN de muestras de sitios contaminados.
INTRODUCCIÓN
El suelo puede contener en adición a los componentes naturales, unamezcla de compuestos extraños o contaminantes de diferentes propiedades químicas. Estudios actuales de ecología microbiana del suelo, basados en métodos de biología molecular, requieren la extracción deADN como paso inicial. Dicha metodología estará limitada por las técnicas de extracción de ADN. Se han propuesto diferentes técnicas, sin embargo siempre se requiere de adecuarlas a las condiciones decada muestra ambiental, ya que generalmente se coextraen junto los ácidos nucleicos, contaminantes que pueden interferir en la utilización posterior del ADN, procesos como PCR, hibridación, digestióncon enzimas, etc.

ANALISIS DE RESULTADOS
1. ¿En qué pasos se realiza la lisis celular?, y explica brevemente como sucede.
La ruptura física comprende técnicas basadas en fuerzas mecánicas,como congelamiento con trituración mediante el mortero con pistilo.
Los compuestos utilizados digieren compuestos que afectan la rigidez de la pared celular, haciendo que la membrana citoplasmática yla pared se rompan.
2. ¿Qué efecto tiene el SDS en las proteínas liberadas después de la lisis celular?
Confiere carga negativa a las proteínas, por lo que sirve para desnaturalizarlas porquerompe los puentes de hidrogeno por el hecho del cambio de polaridad, cambiándolas de estructura terciaria a secundaria.

3. ¿Cuál es la función del PEG en la metodología realizada? Explicabrevemente.
El NaCl a concentraciones altas baja la solubilidad de las proteínas, y viceversa por lo que esto ayuda a que se encuentre en una u otra fase para poder separarla.
Elimina grasas y destruyemembranas celulares, permite la separación de los polisacáridos de los ácidos nucleicos por diferencia de solubilidades en la presencia de dicho detergente. Se une fuertemente al ADN, removiendo...