Extraccion de ADN utilizando levadura

Candida kefyr es un patógeno emergente y es el causante de la mayor parte de las infecciones en el cuerpo humano. Puede infectar la piel, la boca y garganta, las uñas, el tracto respiratorio, eltracto urogenital, el sistema digestivo y el sistema inmunológico. Mientas más debilitado este el sistema inmunológico, más crece este hongo en el cuerpo. Personas con cáncer o VIH tienen una mayorprobabilidad de tener un alto porcentaje de este hongo en su cuerpo. Esto es debido a que consumen fármacos inmunosupresores que debilitan el sistema inmunológico, creando un ambiente donde puedendesarrollarse con mayor facilidad.

Uno de los principales problemas para el diagnóstico de los hongos, como lo es candida kefyr, es la extracción del ácido desoxirribonucleico (ADN). Es un componenteorgánico representativo de todo ser vivo el cual almacena y transporta instrucciones genéticas. Es una macromolécula formada por bases nitrogenadas, ácido fosfórico y una azúcar llamada desoxirribosa,formando una doble hélice. Este se encuentra en el núcleo de la célula, por lo cual Friedrich Miescher, descubridor del ADN, lo llamó “nucleína”.

Para poder analizar y cuantificar el ADN hay queextraerlo de una manera correcta para evitar la destrucción o desnaturalización del mismo. Hay distintos métodos de extracción los cuales consisten en romper el tejido, inactivar las nucleasas celulares yseparar los ácidos nucleicos de la célula. Tres métodos para esto lo son: rotura mecánica, tratamiento químico y digestión enzimática. Primeramente se necesita preparar y almacenar el tejido para quepueda pasar por el rompimiento celular. Luego de obtener el producto del rompimiento del tejido se debe purificar esa muestra eliminando las proteínas para poder precipitar el ADN puro. Antes deprecipitar el ADN, se debe eliminar toda impurezas como las proteínas y los polisacáridos que se extraen en el rompimiento del tejido celular. Se puede purificar mediante la extracción/precipitación,...