extraccion de adn vegetal

INTRODUCCIÒN
La molécula de ADN está constituida por dos largas cadenas de nucleótidos unidas entre sí formando una doble hélice. Las dos cadenas de nucleótidos que constituyen una molécula de ADN, se mantienen unidas entre sí porque se forman enlaces entre las bases nitrogenadas de ambas cadenas que quedan apareadas.(L. Alvarado, 2009)
una de las características de los seres vivientes en sureproducción: con ello, todos ellos utilizan los ácidos nucleicos para almacenar y transmitir la información genética. (S. Quesada, 2007)
Quizás de los procedimientos en biología molecular, el más básico es la purificación de ácidos nucleicos, en la forma de ADN o ARN. Por lo tanto se requieren métodos seguros para la separación de estos componentes de las células. Para lograr esto, se utilizandiversos métodos de extracción dependiendo del tipo de tejido a emplear, fresco, seco o congelado.(disponible en la web)
La biología molecular es una de las herramientas más útiles de las que se vale hoy en día la ciencia y la medicina moderna. La obtención de ácido desoxirribonucleico (ADN), es el punto de partida para la mayoría de análisis genéticos; incluso contando con pequeñas cantidades de ADN,es posible amplificar genes específicos in vitro a través de la reacción en cadena de la polimerasa (PCR por sus siglas en Inglés: Polymerase Chain Reaction) (J. Cervantes, 2003)
OBJETIVOS
Extraer ácidos nucleicos a partir de tejido vegetal









PROCEDIMIENTO
























RESULTADOS Y ANÀLISIS
En esta oportunidad se logro el objetivo propuesto de extraer ADN de tejido vegetal,usando técnicas de biología molecular para llevar a cabo este fin. Para la extracción de este material el tejido pesado (50 mg) es macerado, y posteriormente se adiciona solución buffer de lisis, para romper la membrana que componen a la célula y también la que conforma al núcleo, donde se encuentra el material genético( es lo que interesa en esta práctica). después de esto la muestra es incubada auna temperatura que oscila entre los 65 y 80 ºC, para desnaturalizar ciertas proteínas que hacen parte de la célula y que pueden contaminar el ADN, ya que estas al desnaturalizarse se precipitan, aunque hay que tener en cuenta que a muy altas temperaturas el ADN puede sufrir daño es su estructura.
El acetato de sodio es un componente importante en este proceso debido a que permite al ADNprecipitarse, ya que la adición de la sal, el ADN que está cargado negativamente va a obtener una capa iónica positiva que permite su precipitación. El protocolo de extracción de esta molécula, permite que se lleven a cabo procedimientos como centrifugación, este mecanismo ayuda a separar ciertas moléculas(proteínas, carbohidratos, lípidos, etc.) que no se van a necesitar en la extracción, porque lo que sedesea es tener un ADN supremamente puro.
Por otra parte como postula L.falcon et..al(2000), el alcohol en la solución de precipitación se utiliza para remover la concentración residual de sales y promover la precipitación del ácido nucleico. Cuando se trata de muestras con baja concentración de ácidos nucleicos, comúnmente se utiliza un volumen de muestra de isopropanol, en lugar de dos volúmenesde muestra cuando se trabaja con etanol. La precipitación del ADN es casi inmediata en presencia de la sal y el alcohol, sin embargo se recomienda incubar la muestra durante 20 minutos a -80ºC o durante 45 minutos a -20ºC. Posteriormente, se centrifuga la muestra (15 minutos a 10,000 xg), se remueve la fase acuosa y se lava la pastilla de ADN con etanol al 70% para eliminar todas las sales quepermanezcan en la solución. Las muestras se vuelven a centrifugar (un minuto a 10,000 x g), se elimina el etanol y se deja secar el ADN (15 minutos a 37º C o media hora a temperatura ambiente) hasta que no haya más trazas de alcohol. Similar en dicha práctica se hizo, solo que se uso etanol absoluto, la muestra se dejo a una temperatura de -20ºC durante doce horas. El cloroformo se usa para acabar...