Extracción de ADN
Páginas: 7 (1549 palabras)
Publicado: 9 de febrero de 2014
RESUMEN.
Se realizaron los cálculos necesarios para lograr aislar el ADN del germen de trigo mediante procesos físicos y químicos, de esta manera se pudo purificar el ADN para su posterior análisis.
OBJETIVO.
El alumno obtendrá, purificará e identificará el ácido desoxirribonucleico (DNA) de germen de trigo en el laboratorio, mediante una técnica sencilla y de fácil aplicación.HIPOTESIS.
Podremos aislar el DNA del germen de trigo considerando que todas nuestras sustancias se encuentra bien preparadas y nuestra metodología se la correcta.
INTRODUCCIÓN.
El ADN fue aislado por primera vez en 1869 por Miescher, desde entonces se han hecho varias investigaciones para su estudio.
En 1943 Max Delbruk y Salvador Luria hicieron un modelo experimental con bacteriófagos, enel cual se explicaba la replicación viral y se daba a entender que el ADN era la molécula que transmitía la información genética.
En los primeros años de la década de 1950 descubrieron que la molécula de ADN es muy grande, larga y delgada, y que esta compuesta por nucleótidos compuestos por adenina, guanina, citosina y timina. De esta manera lograron proponer un modelo del ADN, dicho modelomostraba a las bases nitrogenadas acomodadas en la larga cadena de doble hélice entrelazada y sumamente larga.
Se trata de una molécula de gran peso molecular (macromolécula) que está constituida por tres sustancias distintas: ácido fosfórico, un monosacárido aldehídico del tipo pentosa (la desoxirribosa), y una base nitrogenada cíclica que puede ser púrica (adenina ocitosina) o pirimidínica(timina o guanina). La unión de la base nitrogenada (citosina, adenina, guanina o timina) con la pentosa (desoxirribosa) forma un nucleósido; éste, uniéndose al ácido fosfórico, nos da un nucleótido; la unión de los nucleótidos entre sí en enlace diester nos da el polinucleótido, en este caso el ácido desoxirribonucleico.
Una de las propiedades que destacan al DNA es su elevada viscosidad ensoluciones acuosa así como su fragilidad.
Para que la información que contiene el ADN pueda ser utilizada por la maquinaria celular, debe copiarse en primer lugar en unos trenes de nucleótidos, más cortos y con unas unidades diferentes, llamados ARN. Las moléculas de ARN se copian exactamente del ADN mediante un proceso denominado transcripción. La información contenida en el ARN se interpreta usandoel código genético, que especifica la secuencia de los aminoácidos de las proteínas, según una correspondencia de un triplete de nucleótidos (codón) para cada aminoácido. Esto es, la información genética (esencialmente: qué proteínas se van a producir en cada momento del ciclo de vida de una célula) se halla codificada en las secuencias de nucleótidos del ADN y debe traducirse para poderfuncionar. Tal traducción se realiza usando el código genético.
El modo en el que el ADN se copia a si mismo siempre se inicia por el extremo de la cadena 5, hacia la cadena 3 en una solo dirección formando burbujas de replicación. Así la maquinaria de la célula forma nuevas cadenas de ADN idénticas a las ya existentes.
El ADN se encuentra en todas las células de los seres vivos ya sea en el núcleo,el citoplasma, las mitocondrias o los cloroplastos.
Para poder aislar el ADN de una célula es necesario realizar una lisis celular, es decir, la rotura de la membrana celular mediante métodos físicos. Por ejemplo se puede romper mediante sonicación, por choque osmótico, por congelación/descongelación, homogenización con abrasivos, cizalla líquida y cizalla sólida, también se puede hacer pormedios químicos, como tratamientos con alcalisis, con lisozima + EDTA o el empleo de detergentes.
MATERIAL Y EQUIPO.
- Espátula
- Vidrio de reloj
- Mortero con pistilo
- Vasos de precipitados de 100 ml
- Vasos de precipitados de 250 ml
- Agitador de vidrio
- Probeta de 50 ml
- Tubos de ensaye de 13 x 100
- Pipetas de 1 ml
- Pipetas de 5 ml
- Centrífuga clínica
-...
RESUMEN.
Se realizaron los cálculos necesarios para lograr aislar el ADN del germen de trigo mediante procesos físicos y químicos, de esta manera se pudo purificar el ADN para su posterior análisis.
OBJETIVO.
El alumno obtendrá, purificará e identificará el ácido desoxirribonucleico (DNA) de germen de trigo en el laboratorio, mediante una técnica sencilla y de fácil aplicación.HIPOTESIS.
Podremos aislar el DNA del germen de trigo considerando que todas nuestras sustancias se encuentra bien preparadas y nuestra metodología se la correcta.
INTRODUCCIÓN.
El ADN fue aislado por primera vez en 1869 por Miescher, desde entonces se han hecho varias investigaciones para su estudio.
En 1943 Max Delbruk y Salvador Luria hicieron un modelo experimental con bacteriófagos, enel cual se explicaba la replicación viral y se daba a entender que el ADN era la molécula que transmitía la información genética.
En los primeros años de la década de 1950 descubrieron que la molécula de ADN es muy grande, larga y delgada, y que esta compuesta por nucleótidos compuestos por adenina, guanina, citosina y timina. De esta manera lograron proponer un modelo del ADN, dicho modelomostraba a las bases nitrogenadas acomodadas en la larga cadena de doble hélice entrelazada y sumamente larga.
Se trata de una molécula de gran peso molecular (macromolécula) que está constituida por tres sustancias distintas: ácido fosfórico, un monosacárido aldehídico del tipo pentosa (la desoxirribosa), y una base nitrogenada cíclica que puede ser púrica (adenina ocitosina) o pirimidínica(timina o guanina). La unión de la base nitrogenada (citosina, adenina, guanina o timina) con la pentosa (desoxirribosa) forma un nucleósido; éste, uniéndose al ácido fosfórico, nos da un nucleótido; la unión de los nucleótidos entre sí en enlace diester nos da el polinucleótido, en este caso el ácido desoxirribonucleico.
Una de las propiedades que destacan al DNA es su elevada viscosidad ensoluciones acuosa así como su fragilidad.
Para que la información que contiene el ADN pueda ser utilizada por la maquinaria celular, debe copiarse en primer lugar en unos trenes de nucleótidos, más cortos y con unas unidades diferentes, llamados ARN. Las moléculas de ARN se copian exactamente del ADN mediante un proceso denominado transcripción. La información contenida en el ARN se interpreta usandoel código genético, que especifica la secuencia de los aminoácidos de las proteínas, según una correspondencia de un triplete de nucleótidos (codón) para cada aminoácido. Esto es, la información genética (esencialmente: qué proteínas se van a producir en cada momento del ciclo de vida de una célula) se halla codificada en las secuencias de nucleótidos del ADN y debe traducirse para poderfuncionar. Tal traducción se realiza usando el código genético.
El modo en el que el ADN se copia a si mismo siempre se inicia por el extremo de la cadena 5, hacia la cadena 3 en una solo dirección formando burbujas de replicación. Así la maquinaria de la célula forma nuevas cadenas de ADN idénticas a las ya existentes.
El ADN se encuentra en todas las células de los seres vivos ya sea en el núcleo,el citoplasma, las mitocondrias o los cloroplastos.
Para poder aislar el ADN de una célula es necesario realizar una lisis celular, es decir, la rotura de la membrana celular mediante métodos físicos. Por ejemplo se puede romper mediante sonicación, por choque osmótico, por congelación/descongelación, homogenización con abrasivos, cizalla líquida y cizalla sólida, también se puede hacer pormedios químicos, como tratamientos con alcalisis, con lisozima + EDTA o el empleo de detergentes.
MATERIAL Y EQUIPO.
- Espátula
- Vidrio de reloj
- Mortero con pistilo
- Vasos de precipitados de 100 ml
- Vasos de precipitados de 250 ml
- Agitador de vidrio
- Probeta de 50 ml
- Tubos de ensaye de 13 x 100
- Pipetas de 1 ml
- Pipetas de 5 ml
- Centrífuga clínica
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