extracción de ADN

UNIVERSIDAD DE CALDAS
FACULTAD DE CIENCIAS EXACTAS Y NATURALES
LABORATORIO DE BIOLOGÍA GENERAL 2014-I

PRÁCTICA No. 1
DETERMINACIÓN DE BIOMOLÉCULAS: ADN

OBJETIVO:

Obtener ADN empleando unmétodo casero de extracción.

Nota: Durante el proceso anotar las observaciones, éstas serán recogidas por el docente al
final de la clase.
Materiales y Reactivos
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Muestravegetal (Brócoli)
Agua (destilada)
NaCl
NaHCO3
Detergente líquido
Alcohol isoamílico helado
ó etanol absoluto helado
Zumo de papaya o piña

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Licuadora
Nevera o cama dehielo
Colador o
centrífuga
Beaker
Tubos de ensayo
Agitador

Por parejas (del mismo grupo) deben llevar:
- Brócoli
- 10 mL de detergente líquido
- Un vaso de zumo de papaya o piña (sin azúcar)- Un colador
- Una palo de madera muy delgado (palo de chuzo)
La extracción de ADN requiere una serie de etapas básicas. En primer lugar tiene que
romperse la pared celular y la membrana plasmáticapara poder acceder al núcleo de la
célula. A continuación debe romperse también la membrana nuclear para dejar libre el
ADN. Por último hay que proteger el ADN de enzimas que puedan degradarlo ypara
aislarlo hay que hacer que precipite en alcohol.

Procedimiento
Cortar el brócoli en cuadros, en un beaker agregar 6 mL de detergente, 5g de NaCl y 0,3g
de NaHCO3 de añadir agua destiladahasta llenar el beaker, mezclar esta solución con los
trozos de brócoli y licuar de 30 segundos a un minuto.
Filtrar el líquido obtenido y llenar hasta la mitad del segundo beaker, añadir 5 ml de zumode piña a papaya, mezclar bien.
Añadir un volumen de alcohol muy frío equivalente al del filtrado, cuidadosamente,
haciéndolo resbalar por las paredes del vaso para que forme una capa sobre elfiltrado.
Utilizar el agitador como soporte.
Se deja reposar por un minuto, se introduce el palo de madera delgado un poco por debajo
de la separación entre el alcohol y el tampón. Mover el palo...