FARMACOLOGIA
MATERIAL Y METODOS
DESARROLLO DE LA PRÁCTICA
MATERIAL REACTIVOS EQUIPO
Tubos de ensaye 13 x 100 Suero fisiológico estéril Agitador vortex
Asa bacteriológica Agarmueller-hinton Incubadora
Hisopos esteriles Agar mueller – hinton con sangre al 5%
Cajas petri esteriles Semidiscos de antimicrobianos a estudiar
METODO DE SUSPENSIÓN DIRECTA DECOLONIAS:
1.- De una placa de petri tomar el contenido de un cultivo puro de la cepa a estudiar de 18 a 24 hrs.(imagen 1.1), varias colonias con un asa y ajustar el inoculo a unaturbidez en 0.5 en suero fisiológico. Utilizar el agitador “vortex” durante 15-20 segundos. (
2.-Antes de que transcurran 15 minutos de haber ajustado el inoculo, introducir un hisopoestéril dentro de la suspensión y al retirarlo rotar varias veces contra la pared del tubo por encima del nivel del liquido con la finalidad de eliminar el exceso del inoculo.3.-inocular las placas de mueller-hinton completamente, sin dejar ninguna zona libre. Esto se consigue deslizando el hisopo por la superficie del agar tres veces, para conseguir una siembrauniforme.
4.- dejar secar de 3 a 5 minutos antes de depositar los discos. Colocar los discos con los dispensadores o manualmente con pinzas estériles. Debe asegurarse quecontacten perfectamente con la superficie del agar, por lo que deben presionarse ligeramente sobre la superficie del agar, no deben situarse a menos de 15 mm del borde de la placa y han deestar distribuidos de forma que no se produzca superposición de los halos de inhibición. Para placas de 150 mm no se emplearan más de 12 discos y para las de 100 mm no más de 6.5.-incubar las placas invertidas (agar en la parte superior), en grupos no superiores a 5 placas, a 35°C en atmosfera aerobica antes de que transcurran 15 minutos
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