fitoquimica

La Ninhidrina de Thermo Scientific Pierce se ha usado en todos los avances en análisis de aminoácidos desde que en 1949 Stein y Moore1, desarrollaron las bases de los métodos cromatográficos. Asílos procedimientos más actuales y los instrumentos más sensibles necesitan la excelente respuesta de color y blancos limpios que sólo la ninhidrina puede ofrecer.
La Ninhidrina de Thermo ScientificPierce es estable indefinidamente y no necesita refrigeración o cuidados especiales para su almacenamiento: es suficiente mantener la botella bien cerrada, evitar el sol directo y el amoníaco en laatmósfera del laboratorio.
La reacción entre los compuestos que contengan aminoácidos y la ninhidrina es muy sensible. McCaldin ha estudiado todas las fases de la química de la Nihidrina y ha propuesto unmecanismo para la reacción con los aminoácidos, teniendo en cuenta los aldehídos, dióxido de carbono, amoniaco e hidridantina4. Con los aminoácidos secundarios prolina e hidroxiprolina, se forma uncompuesto amarillo (detectable a 440 nm)5. La Ninhidrina decarboxila y deamina los aminoácidos primarios formando el compuesto púrpura conocido como Púrpura de Ruhemann6, que absorbe a 570 nm.
En 1958Spackman, Stein y Moore7, adaptaron esta reacción a un sistema totalmente automático de análisis de aminoácidos con dos columnas. Moore y Stein definieron las necesidades de un agente reductor (comoel cloruro de estaño) para obtener valores de color reproducibles para el análisis de aminoácidos con nihnidrina8. James sugirió el uso de cloruro de titanio para eliminar los precipitados causadospor el usos del cloruro de estaño9-11. Los solventes más usuales son el metilcellosolve (etilénglicol monometil éter) tamponado a pH 5.5 con Acetato Sódico 4M12, y el DMSO tamponado a pH 5.213 conacetato de Litio, éste último permitiendo una mayor estabilidad que el metilcellosolve (Kirschenbaum 14). El rol de la hidridantina en el análisi de aminoácidos fue descrito por Lamonthe y McCormick15....