Fundamentos De Espectrofotometria
Páginas: 6 (1398 palabras)
Publicado: 16 de abril de 2012
Universidad Nacional Autónoma de Mexico
“Fundamentos de espectrofotometría”
I. OBJETIVO GENERAL
Conocer y aplicar los fundamentos de la espectrofotometría para la determinación de concentraciones en soluciones.
II. OBJETIVOS PARTICULARES
a. Conocer los fundamentos de la espectrofotometría y las variables involucradas en la ley de Lambert-Beer-Bourger.
b. Seleccionar lalongitud de onda apropiada para las mediciones de absorbancia.
c. Construir una curva patrón de soluciones de yodo (serie tipo).
INTRODUCCIÓN
El estudio a nivel bioquímico de cualquier compuesto requiere la utilización de técnicas analíticas que permitan su determinación cualitativa y cuantitativa, así como su caracterización físico-química y biológica. Uno de los métodos más sencillos,accesibles, útiles y utilizados es la espectroscopia, en general, y la espectroscopia ultravioleta-visible, en particular. El fundamento de la espectroscopia se debe a la capacidad de las moléculas para absorber radiaciones, entre el las radiaciones dentro del espectro UV-visible. Las longitudes de onda de las radiaciones que una molécula puede absorber y la eficiencia con la que se absorbendependen de la estructura atómica y de las condiciones del medio (pH , temperatura, fuerza iónica, constante dieléctrica) . Las moléculas pueden absorber energía luminosa y almacenarla en forma de energía interna. Cuando la luz (considerada como energía) es absorbida por una molécula se origina un salto desde un estado energético basal o fundamental, E1 , a un estado de mayor energía (estado excitado) ,E2. Y sólo se absorberá la energía que permita el salto al estado excitado. Cada molécula tiene una serie de estados excitados (o bandas) que la distingue del resto de moléculas. Como consecuencia, la absorción que a distintas longitudes de onda presenta una molécula esto es, su espectro de absorción, constituye una señal de identidad de la misma. Por último, la molécula en forma excitada liberala energía absorbida hasta el estado energético fundamental.
FENÓMENO DE ABSORCIÓN
“Espectro de Absorción”. Cada especie absorbente, que recibe el nombre de cromógeno, tiene un determinado espectro de absorción. El espectro de absorción de una sustancia es un gráfico donde se representa en ordenadas la Absorbancia y en abscisas la longitud de onda. La medida de la cantidad de luzabsorbida por una solución es el fundamento de la espectrofotometría de absorción.
FENÓMENO DE EMISIÓN
Algunos compuestos, tras ser excitados por la luz, vuelven al estado fundamental produciendo la emisión de energía radiante. En este caso, lo que se mide es la energía emitida y, en este fenómeno se basa la “fotometría de llama” o la “fluorescencia”.
LEYES DE ABSORCIÓN
Cuando unhaz de luz pasa a través de un medio, se registra una cierta pérdida de intensidad, debido a la absorción por parte de la sustancia.
Se llama “TRANSMITANCIA (T)” a la relación entre la luz incidente y la luz transmitida:
La Transmitancia se usa poco, se emplea más la Absorbancia (A) porque la relación entre A y la concentración de una solución es directamente proporcional y la de la T esinversamente proporcional.
LEY DE BEER
“La absorbancia de una solución es directamente proporcional a la concentración y a la longitud del paso de la luz”.
A = e . b. c
Siendo:
A: absorbancia. No tiene unidades.
e: el coeficiente de extinción molar, también llamado coeficiente de absorción. Es constante para un compuesto dadosiempre que se fijen condiciones de longitud de onda, de pH, de temperatura, de solventes, etc. Sus unidades son L/ (mol cm).
b: es la longitud de paso de la luz, en cm.
c: es la concentración del absorbente. Se mide en mol/L.
La aplicación práctica de la Ley de Beer es, que conociendo la absorbancia de una sustancia podemos averiguar su concentración.
REACTIVOS Y MATERIALES
I2-KI...
“Fundamentos de espectrofotometría”
I. OBJETIVO GENERAL
Conocer y aplicar los fundamentos de la espectrofotometría para la determinación de concentraciones en soluciones.
II. OBJETIVOS PARTICULARES
a. Conocer los fundamentos de la espectrofotometría y las variables involucradas en la ley de Lambert-Beer-Bourger.
b. Seleccionar lalongitud de onda apropiada para las mediciones de absorbancia.
c. Construir una curva patrón de soluciones de yodo (serie tipo).
INTRODUCCIÓN
El estudio a nivel bioquímico de cualquier compuesto requiere la utilización de técnicas analíticas que permitan su determinación cualitativa y cuantitativa, así como su caracterización físico-química y biológica. Uno de los métodos más sencillos,accesibles, útiles y utilizados es la espectroscopia, en general, y la espectroscopia ultravioleta-visible, en particular. El fundamento de la espectroscopia se debe a la capacidad de las moléculas para absorber radiaciones, entre el las radiaciones dentro del espectro UV-visible. Las longitudes de onda de las radiaciones que una molécula puede absorber y la eficiencia con la que se absorbendependen de la estructura atómica y de las condiciones del medio (pH , temperatura, fuerza iónica, constante dieléctrica) . Las moléculas pueden absorber energía luminosa y almacenarla en forma de energía interna. Cuando la luz (considerada como energía) es absorbida por una molécula se origina un salto desde un estado energético basal o fundamental, E1 , a un estado de mayor energía (estado excitado) ,E2. Y sólo se absorberá la energía que permita el salto al estado excitado. Cada molécula tiene una serie de estados excitados (o bandas) que la distingue del resto de moléculas. Como consecuencia, la absorción que a distintas longitudes de onda presenta una molécula esto es, su espectro de absorción, constituye una señal de identidad de la misma. Por último, la molécula en forma excitada liberala energía absorbida hasta el estado energético fundamental.
FENÓMENO DE ABSORCIÓN
“Espectro de Absorción”. Cada especie absorbente, que recibe el nombre de cromógeno, tiene un determinado espectro de absorción. El espectro de absorción de una sustancia es un gráfico donde se representa en ordenadas la Absorbancia y en abscisas la longitud de onda. La medida de la cantidad de luzabsorbida por una solución es el fundamento de la espectrofotometría de absorción.
FENÓMENO DE EMISIÓN
Algunos compuestos, tras ser excitados por la luz, vuelven al estado fundamental produciendo la emisión de energía radiante. En este caso, lo que se mide es la energía emitida y, en este fenómeno se basa la “fotometría de llama” o la “fluorescencia”.
LEYES DE ABSORCIÓN
Cuando unhaz de luz pasa a través de un medio, se registra una cierta pérdida de intensidad, debido a la absorción por parte de la sustancia.
Se llama “TRANSMITANCIA (T)” a la relación entre la luz incidente y la luz transmitida:
La Transmitancia se usa poco, se emplea más la Absorbancia (A) porque la relación entre A y la concentración de una solución es directamente proporcional y la de la T esinversamente proporcional.
LEY DE BEER
“La absorbancia de una solución es directamente proporcional a la concentración y a la longitud del paso de la luz”.
A = e . b. c
Siendo:
A: absorbancia. No tiene unidades.
e: el coeficiente de extinción molar, también llamado coeficiente de absorción. Es constante para un compuesto dadosiempre que se fijen condiciones de longitud de onda, de pH, de temperatura, de solventes, etc. Sus unidades son L/ (mol cm).
b: es la longitud de paso de la luz, en cm.
c: es la concentración del absorbente. Se mide en mol/L.
La aplicación práctica de la Ley de Beer es, que conociendo la absorbancia de una sustancia podemos averiguar su concentración.
REACTIVOS Y MATERIALES
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