FUNDAMENTOS DE PRUEBAS BIOQUIMICAS

FUNDAMENTOS DE PRUEBAS BIOQUIMICAS
Agar de mueller hinton
USO Para pruebas se susceptibilidad antimicrobiana de bacterias patógenas de importancia clínica por el método de difusión en disco (Kirby-Bauer).
PRINCIPIO La peptona de caseína ácida y la infusión de carne de res proporcionan los nutrientes necerarios para favorecer el crecimiento, estos ingredientes tienen un bajo contenido en timinay timidina que evitan la interferencia en la determinación de la CMI para el sulfametoxasol trimetoprim. El calcio y el magnesio se adicionan para una mejor determinación de la CMI, de acuerdo a la NCCLS M07-A6. Este medio adicionado con sangre de carnero al 5% (Agar Mueller-Hinton con sangre de carnero No. de Catálogo 1225-P), se recomienda para la sensibilidad de Streptococcus viridans. Cuandose agrega hemoglobina y enriquecimiento (Agar Mueller HintonChocolate polienriquecido, No. de Catálogo 1221-P), es usado para pruebas de sensibilidad de Neisserias. El procedimiento se basa en las sustancias antimicrobianas impregnadas en discos de papel que se difunden en el agar produciendo diámetros de inhibición que se correlacionan con un patrón de medición establecido (concentración mínimainhibitoria, CMI). La técnica estándar para la prueba de susceptibilidad de antimicrobianos se establece en el manual de NCCLS.
Caldo nutritivo
USO Para el aislamiento y cuenta de microorganismos poco exigentes a partir de diversas muestras. En pruebas para comprobación de esterilidad.
. PRINCIPIO El medio contiene extracto de carne, peptona y agar, siendo una formulación suficiente para eldesarrollo de los microorganismos. El extracto de carne proporciona al medio fuente de carbohidratos, de nitrógeno y vitaminas. El empleo de este medio es de acuerdo al tipo de estudio por realizar.
Gelosa sangre
USO Este medio de cultivo adicionado de sangre de carnero o conejo desfibrinada estéril es adecuado para el aislamiento de bacterias a partir de diversas muestras e investigar su actividadhemolítica.
PRINCIPIO La base de agar sangre es un medio nutritivo en donde la infusión de músculo cardiaco y la peptona, proporcionan las fuentes de carbono, nitrógeno, vitaminas y factores de crecimiento. El cloruro de sodio actúa manteniendo el equilibrio osmótico. Sembrar las placas sobre la superficie del medio de cultivo por estría cruzada y picadura sobre las estrías, lo que permite observar conmayor claridad la actividad hemolítica como resultado de la acción bacteriana. Incubar 24 – 48 h a 35ºC.
Gelosa sangre y azida de sodio
Medio adecuado para el aislamiento de estreptococos y estafilococos de diversos materiales, debido a que la azida sódica inhibe la flora Gram negativa. Adicionado con sangre, este medio es adecuado para estudiar reacciones de hemólisis. 

Fundamento Este mediopuede ser usado para los aislamientos primarios de estafilococos y estreptococos a partir de materiales diversos de importancia sanitaria, compuestos de una flora mixta. 
La presencia de pluripeptona y extracto de carne, proveen nutrientes para el desarrollo de microorganismos, aún de aquellos con exigencias nutricionales. El cloruro de sodio mantiene el balance osmótico.
A la concentración empleada,la azida de sodio ejerce un efecto bacteriostático solamente sobre los microorganismos Gram negativos, favoreciendo el desarrollo de los Gram positivos.
Urea de crhistensen
USO Para la diferenciación de bacterias en base a su capacidad de hidrolizar la urea, principalmente de los géneros Klebsiella, Enterobacter y Citrobacter que lo realizan lentamente y del género Proteus.
PRINCIPIO La urea eshidrolizada por los microorganismos que producen la enzima ureasa formando dióxido de carbono y amoniaco. Este último proporciona reacción alcalina al medio que puede observarse por el vire del indicador de pH rojo de fenol que cambia de amarillo a rosa intenso. Debido a la composición del medio de cultivo, se detecta la hidrólisis de la urea por las bacterias con actividad lenta debido a la...