gram

ASCÍTICO y el LÍQUIDO SINOVIAL.
La tincion de gram es una tinción diferencial para distinguir bacterias gram positivas (violetas) de las gram negativas (rosadas). Para realizarla debes emplear los siguientes reactivos:
1. Cristal Violeta o Violeta de Genciana;
2. Lugol;
3. Alcohol 96º
4. Safranina como colorante básico diferenciador.

Los colorantes es mejor si se los conservaen frascos color caramelo lo mismo que al lugol, al alcohol no hace falta. Y puedes tenerlos a mano donde realices la coloración. En cuanto a su cantidad, que sea la suficiente para cubrir el frotis en su totalidad para que no queden zonas sin teñir. Suerte! y recuerda de usar guantes!

Aqui esta la informacion que estan buscando sobre la coloracion gram.

Primer paso de la coloracion esPreparar un Frotis:

PREPARACION
La preparación del frotis es algo distinta según que el material a estudiar provenga de un medio sólido o líquido.
a. Si es a partir de un medio sólido:
- depositar con el asa una gota de agua en el centro de la lámina,
- tocar con el asa estéril una porción de la colonia a estudiar,
- suspender el material recogido en la gota de agua,
- extenderhomogéneamente la suspensión con la misma asa mediante varios giros para que el frotis
quede delgado.
b. A partir de un medio líquido o material patológico.
En estos casos no se necesita diluir el material a estudiar en agua, sino que se toma con el asa estéril una gota del
caldo de cultivo y se coloca directamente sobre la lámina.
SECADO
Puede dejarse secar a temperatura ambiente (desecaciónespontánea) o para apresurar este paso conviene pasar la
lámina varias veces y en forma rápida sobre el mechero, en la zona de aire caliente (alto).
FIJACION
Con este paso se pretende obtener la muerte de los gérmenes, su adhesión a la lámina y la conservación de su
morfología.
También en este caso existen diferentes posibilidades:
a. fijación por el calor; la más usada enBacteriología. Consiste en pasar en forma rápida la lámina con la cara
conteniendo el frotis mirando hacia arriba, tres veces por la parte más caliente de la llama del mechero
(bajo);
b. fijación por sustancias químicas, como por ejemplo el alcohol metílico (metanol).
Luego de preparar el frotis de esta forma puede ser sometido -previo enfriamiento- a cualquier tipo de coloración,
ya sea simple odiferencial.

Segundo paso, llevar a cabo la coloración:

COLORACION

TECNICA DE GRAM
En esta técnica se utilizan, como dijimos, varios colorantes en pasos sucesivos a los que se les debe respetar su
orden y tiempo de aplicación para lograr resultados fiables. Cada una de estas sustancias se coloca sobre la lámina
ubicada en un soporte en la bandeja y se deja actuar el tiempo indicadopara cada una de ellas, luego de lo cual se
vuelca la sustancia y se arrastra el remanente con agua para continuar con la sustancia siguiente. Mostramos ahora
las diferentes sustancias, los tiempos de aplicación recomendados y los resultados obtenidos en los diferentes pasos.

RESULTADOS

La técnica de Gram nos aporta múltiples datos como ya vimos, por ejemplo, según el comportamientofrente a estos
colorantes las bacterias se clasifican en:
a. Gram positivas, si se colorean de color violeta.
b. Gram negativas, si se colorean de color rosado o rojo.
c. Gram variable, si existen células teñidas de color violeta y rosado simultáneamente. Ello puede ser debido
a una mala técnica de tinción, a que las células son viejas, a que se produjo un daño en su pared celular, o aque son por naturaleza Gram variables.
d. Gram neutrales, si no toman ningún colorante (ni el cristal violeta ni el de contraste). Aparecen sin color en
un fondo rosado (Gram negativo). Es el ejemplo de las micobacterias y hongos.
Nos permite, además, definir las formas predominantes:
a. de la célula bacteriana; cocos, bacilos o filamentos;
b. de las terminaciones; cóncavas, redondas,...