Granulocitos

Revista Latinoamericana de Actualidades Biomédicas

ISSN 0718-4743

_______________________________________________ EVALUACION DEL ESTALLIDO RESPIRATORIO EN GRANULOCITOS DE PACIENTES CON ALTERACIONES CLINICAS DE LA FUNCION FAGOCITICA
Castillo, Juan Luis1,2,3;Venegas, Oscar1; Pereira, Paulina2,3; Ibacache, Michael1a Venegas,
(1) (2) (3) a Departamento de Especialidades, Facultad de Medicina,Universidad de Concepción, Chile. Laboratorio Citometría de Flujo, Hospital del Trabajador, Concepción. Centro de Diagnóstico Oncoinmuno Oncoinmunológico Limitada. Estudiante IV Año, Tecnología Médica, Mención Laboratorio Clínico, Departamento de Especialidades Médicas, Facultad de Medicina, Universidad de Concepción.

Introducción: Estallido respiratorio (ER) es la denominación que se le da alfenómeno de formación de moléculas altamente reactivas del oxígeno, como ión superóxido y peróxido de hidrógeno, producto de la actividad catalítica del complejo enzimático NADPH oxidasa, durante la destrucción de microorganismos durante fagocitados. Para evaluar ER se han utilizados diversas sustancias fluorescentes, entre ellas la diclorofluoresceína (DCFDA) y la 123 123-dihidrorodamina(123-DHR). El objetivo de este trabajo es comparar ambas técnicas en pacientes con y sin alteraciones clínicas de la función fagocítica. Materiales y métodos: Se evaluaron 27 sujetos voluntarios, sin antecedentes de EGC, de los cuales 18 presentaban diagnóstico clínico de disfunción fagocítica. Se utilizó sangre periférica usando heparina de litio como anticoagulante. Como activador se utilizó forbol 1212-miristato 13-acetato (PMA). Se usó DCFDA y 123acetato 123 DHR como fluorocromos. La adquisición y análisis se efectuaron en citómetro de flujo FACSCalibur. Resultados: En pacientes con diagnóstico clínico de disfunción fagocítica (DF), en 17 (94.44 %) y 2 (7.4 %), on se observó un delta de estimulación (DE) en granulocitos disminuido usando DCFDA y 123 123-DHR, respectivamente. Para DCFDA, lasdiferencias en el DE en granulocitos, en pacientes con y sin DF, son pacientes estadísticamente significativas (p0.05). Para DE en 123-DHR granulocitos, la especificidad, sensibilidad, VPP y VPN fueron de 94.44%, 77.78%, 89.47% y 87.50%, respectivamente. Conclusión: la DCFDA para evaluar ER en granulocitos, si bien es más inespecífica, es una buena técnica CFDA para discriminar pacientes con DFque no correspondan a una enfermedad granulomatosa crónica, donde la 123-DHR es más específica. (Rev. latinoam. actual. bioméd. 2008; 2:26-30) Rev.

Introduction: Respiratory burst (ER) is the name given to the phenomenon of formation of highly reactive : oxygen molecules, such as superoxide ion and hydrogen peroxide, a product of the catalytic activity of the NADPH oxidase enzyme complex, duringthe destruction of phagocyted microorganisms. To assess ER have been used various fluorescent substances, including diclorofluoresceína (DCFDA) and 123 dihydrorhodamine 123-dihydrorhodamine (123-DHR). The aim of this study is to compare these two techniques in patients with and without clinics DHR). alterations of phagocytes function. Materials and methods: 27 volunteers subjects with no historyof EGC were evaluated, of whom 18 had clinical : diagnosis of phagocyte dysfunction. We used peripheral blood with lithium heparin as anticoagulant. As activator was used phorbol 12-myristate 13 acetate (PMA). As fluorochromes was used DCFDA and 123-DHR. myristate 13-acetate 123 The acquisition and analysis were performed in a FACSCalibur flow cytometer. Results: In patients with clinical diagnosisof phagocytes dysfunction (DF), 17 (94.44%) and 2 (7.4%), there (94.44%) was a stimulation delta (DE) in granulocytes declined using DCFDA and 123 DHR, respectively. For DCFDA, 123-DHR, differences in the DE in granulocytes, in patients with and without DF are statistically significant (p 0.05). To DE in granulocytes, specificity, sensitivity, PPV and NPV were DHR 94.44%, 77.78%, 89.47% and...