Guia De Genetica

Indicios biológicos: son los indicios que por su naturaleza pudieran contener células de un ser vivo.

Tipos de indicios biológicos:
Visibles:
Manchas de: sangre, semen.
Tejidos de: piel, tejido blandos (hígado, tejido muscular, cordón umbilical)
Dientes
Huesos
Pelos
Uñas
No Visibles:
Manchas de: sangre lavada, semen en cavidades, semen en prendas.
Saliva sobre objetos (colillas decigarros, chicle, vasos, botellas, sobre la piel, papel)

Clasificación de cantidad ADN:
Gran cantidad de ADN: muestra de saliva en hisopos, sangre en FTA o en liquido, tejido blando en buen estado, huesos frescos.
Poca cantidad de ADN: manchas de sangre o semen, pelos, huesos semi-calcinados o putrefactos, saliva sobre objetos, prendas de desaparecidos, uñas.
Sin ADN: huesos completamente carbonizados,orina.

Dogma en Genética forense:
1. Colección y embalaje
2. Resguardo
3. Extracción
4. Cuantificación
5. PCR (PRE-PCR, POST-PCR)
6. Interpretación de resultados (Análisis y Dictamen)
7. Base de datos

1.- Colección y embalaje: de los indicios recolectados en la escena del crimen.

2.- Resguardo: resguardo de los indicios llegados al laboratorio, se les etiqueta con un numero de banco deentrada.

3.- Extracción: el objetivo de este paso es extraer ADN de buena calidad y alta pureza.
La extracción es la liberación del ADN del interior del núcleo celular y se lleva a cabo por medio de la lisis celular o rompimiento de las paredes celulares y nucleares. Este el paso mas importante del proceso de una muestra forense, ya que de el depende que se obtenga un buen resultado.
Existendiferentes técnicas para la extracción de ADN, estas dependen del tipo de indicio que se va a procesar, así mismo se dividen en dos grupos básicos de protocolos:
Los protocolos Básicos: Chelex, Orgánica y Diferencial
Técnica de extracción en Chelex: es una resina quelante captadora de iones polivalentes que permite extraer el ADN a partir de diferentes sustratos de manera rápida y sencilla. Se coloca unfragmento de muestra en un tubo de 1.5 ml., se agrega 300 microlitros de Chelex al tubo con la muestra, incubándolo por 30 minutos a 56º grados. Es Rápida, el tiempo es de aproximadamente una hora, Sencilla, Económica y presenta una Menor Toxicidad: los productos que se utilizan son menos contaminantes y tóxicos. Sus desventajas son la capacidad de purificación del ADN es mucho menor, ya se limita abloquear el exceso de iones y no elimina otro tipo de moléculas como proteínas que pueden interferir en el análisis, el rendimiento en cuanto a cantidad de ADN que logra extraer es también menor que el de otro métodos.
Esta técnica se utiliza para muestras referencia (con mucho ADN), sangre en FTA, sangre liquida, saliva en hisopos.
Orgánica con fenol-cloroformo: es el método mas utilizado paramuestras que se presume poca cantidad de ADN o pueda estar parcialmente dañado.
El primer paso consiste en la rotura de las membranas celulares mediante la incubación (56ºC grados de 18 a 24 horas). Segundo paso: una vez libre el ADN este es purificado mediante una mezcla de solventes no miscibles, uno acuoso (cloroformo) y otro orgánico (fenol) con la ayuda de filtros especiales para suconcentración y purificación.
La capacidad purificadora y la cantidad de ADN extraído es mucho mayor que la de Chelex, sin embargo el método es mas lento se requiere de dos días, al igual que sus reactivos son altamente tóxicos y caros, su manipulación es mayor por lo que existe un mas riesgo de contaminación.

Técnica Diferencial: esta extracción se hace solo en casos de violaciones (hisopos vaginaleso manchas de semen en prendas) su objetivo es separar los tipos de células femeninas de las masculinas. Por lo que se divide en dos fracciones:
Fracción Femenina (FF) procedente del ADN de las células epiteliales de la vagina femenina.
Fracción Masculina (FM) procedente del ADN de las células espermáticas.

Los protocolos Comerciales: equipo Automate, se lleva acabo mediante un robot que realiza...