GUIONBQBiotecnología 2015 16 2

PRACTICAS DE BIOQUÍMICA

DEPARTAMENTO DE QUÍMICA Y FÍSICA
ÁREA DE BIOQUÍMICA Y BIOLOGÍA MOLECULAR
UNIVERSIDAD DE ALMERÍA

FELIPE RODRÍGUEZ VICO
FRANCISCO JAVIER LAS HERAS VÁZQUEZ
JOSEFA MARÍA CLEMENTE JIMÉNEZ

NOMBRE:
FECHA:
ESTUDIOS:

1

2

PROLOGO
Estas prácticas se dividen en tres partes. En la primera, se describen los
objetivos que se persiguen en las prácticas a realizar, así como lastécnicas y
herramientas necesarias para ello. El segundo bloque corresponde a cada una
de las prácticas, las tres primeras vienen precedidas por un capítulo donde se
introducen los aspectos fundamentales de la Fotocolorimetría. En este capítulo
se describen las Leyes que relacionan la concentración de un compuesto en
disolución y la absorción de luz realizada por la misma, se estudia el Espectro
deAbsorción de un compuesto en disolución, por último analizamos el aparato
utilizado para este tipo de medidas fotocolorimétricas, el fotocolorímetro. La
cuarta práctica corresponde a la determinación del peso molecular de un
monómero de proteína mediante la técnica de la electroforesis en condiciones
desnaturalizantes. La tercera parte de este libro corresponde al listado de
reactivos utilizados enlas prácticas. Al final del libro se enumera una lista de
libros de Bioquímica, que tanto desde el punto de vista teórico como práctico
complementan la información aquí expuesta.
La finalidad última de esta obra es que los estudiantes tomen contacto
por primera vez con un Laboratorio de Bioquímica, resuelvan problemas
concretos con herramientas bioquímicas y comprendan que para poder
elaborar unasconclusiones son necesarias una serie de resultados las
evidencien.

3

4

Prácticas de Bioquímica (Biotecnología)

ÍNDICE

página

ÍNDICE

5

NORMAS GENERALES

7

OBJETIVOS ESPECÍFICOS

9

OBJETIVOS GENERALES

9

FOTOCOLORIMETRÍA

11

DETERMINACIÓN CUANTITATIVA DE PROTEÍNAS

17

ESTUDIO DE LA ACTIVIDAD ACETILCOLINESTERASA

23

DETERMINACION DE GLUCOSA EN SANGRE.
METODO DE LA GOD-POD

31ELECTROFORESIS EN GELES DE POLIACRILAMIDA
EN PRESENCIA DE SDS (Condiciones desnaturalizantes)

37

CÁLCULOS PRÁCTICAS BIOQUÍMICA

43

BIBLIOGRAFÍA

47

5

Prácticas de Bioquímica (Biotecnología)

6

Prácticas de Bioquímica (Biotecnología)

NORMAS GENERALES DE LABORATORIO
El sitio de trabajo deberá permanecer limpio en todo momento. No deberá
dejarse sobre la mesa ningún material que esté sucio.
Nuncadeberá probarse nada, ni oler directamente ninguna sustancia que emita
vapores.
Las pipetas jamás deberán colocarse horizontalmente cuando contengan algún
líquido, para evitar la entrada de éste en el interior de la pipeta.
Antes de realizar cada paso del protocolo, leer detenidamente el guión con
objeto de evitar equivocaciones que serían de difícil solución.
Cuando se haya extraído un reactivode su recipiente nunca devolver el
sobrante a su interior, procurando pesar solo la cantidad necesaria.
Etiquetar adecuadamente todos los reactivos así como el material de trabajo,
para evitar confusiones.
Cuando se produzca la caída accidental de productos químicos corrosivos
sobre la piel u ojos, lavar inmediatamente con agua abundante y avisar al
profesor.
Para un mejor funcionamiento de lasprácticas los alumnos deberán
permanecer en silencio y en su lugar de trabajo pidiendo al profesor todo
aquello que necesiten.
El cuaderno de prácticas deberá entregarse a lo largo de la semana siguiente a
su finalización, siendo éste, requisito indispensable para poder optar al examen
teórico de la asignatura.

7

Prácticas de Bioquímica (Biotecnología)

8

Prácticas de Bioquímica (Biotecnología)OBJETIVOS ESPECÍFICOS DE LAS PRÁCTICAS DE BIOQUÍMICA
Aprendizaje de operaciones básicas en el laboratorio de Bioquímica
Determinación cuantitativa de proteínas y glucosa en zumos, utilizando
técnicas espectrofotométricas.
Estudio y seguimiento de la cinética de una determinada enzima.
Visualización de
desnaturalizantes.

proteínas

mediante

electroforesis

en

condiciones

Aislamiento y...