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Páginas: 6 (1273 palabras)
Publicado: 2 de noviembre de 2012
PRACTICA Nº 7
TINCIONES SIMPLES, COMPUESTAS Y OBSERVACION MICROSCOPICA DE BACTERIAS
J. Cardona2 207512, D. Velasquez.1 510565, R. Zuñiga2 111085, J. Garnica1 509517.
Departamento de ciencias biológicas. 1Facultad De Ingeniería Y Administración. 2 Facultad De Ciencias Agropecuarias. Universidad Nacional De Colombia Sede Palmira
RESUMEN
En el laboratorio de microbiología es fundamentalque el personal que realice un trabajo de investigación conozca y aplique los diferentes tipos de tinciones simples o tinciones compuestas. Los objetivos desarrollados en esta práctica de tinciones fueron adquirir destrezas para realización de las mismas en bacterias teniendo en cuenta su funcionalidad y finalidad de la tinción, posteriormente observarlas en el microscopio con el fin de conocerlas ydiferenciarlas por sus aspectos morfológicos. en esta práctica se obtuvieron las bacterias de medios de cultivo solido y liquido, a continuación se realizaron cuatro tinciones que fueron: tinción de flagelos, tinción de capsulas, tinción de gram y tinción de esporas, en las dos últimas utilizando frotis, luego se paso a montar de una en una las cuatro placas en el microscopio de luz hastallegar al objetivo de inmersión con la finalidad de observar y analizar las diferentes características de las bacteria , Gracias a esta práctica se adquirieron destrezas en el momento de realizar una tinción además de conocer sus funciones y finalidades, como también de practica en el uso microscopio, siendo esta práctica de laboratorio muy completa.
Palabras Clave: cromóforo, auxócromo.Introducción
Los microorganismos generalmente son demasiado pequeños y complejos para observarlos a simple vista, además, son incoloros y traslucidos. Cada microorganismo presenta características que lo diferencia de los demás como: nutrición, estructura, tamaño, etc., razón por la cual se recurre a la microscopia, que facilita ostensiblemente su observación, ahora bien uno de los métodos fundamentalespara la observación de estos organismos bajo el microscopio son las tinciones, ya que facilita la observación de ciertas estructuras celulares y permite su diferenciación (Castillo. 2004).
Las tinciones son preparadas en soluciones acuosas y orgánicas de colorantes o grupo de colorantes que le proporcionan una coloración a los microorganismos, las tinciones pueden ser simples o compuestas.Los colorantes son compuestos orgánicos que contienen un grupo benceno que por lo general es incoloro, un grupo cromóforo el cual le confiere el color al benceno, y un auxócromo que le proporciona al cromóforo la capacidad de iniciación, los colorantes también sirven como indicadores de cambio de pH o de oxido-reducción (Rojas. 2011).
Materiales:
Asa bacteriológica, bandejas para tinción,mechero de bunsen, Microscopio compuesto, portaobjetos, azul de metileno, cristal violeta, lugol de gram, alcohol acetona, safranina, verde malaquita, fucsina, cultivos bacterianos en agar, cultivos bacterianos en caldo nutritivo, acido sulfúrico 1%, azul de metileno de Zeehl-Neelsen, reactivo de Hiss, reactivo de Albert, tinta china, colorante de Leifson, solución de fenol 5%, Fucsina carbólica deZeehl-Neelsen, aceite de inmersión.
Métodos
1. Se realiza el frotis a cada una de las láminas de la siguiente forma: a. se limpia la laminilla con alcohol y papel de lentes, b. si es líquido, se colocan dos gotas del cultivo sobre el portaobjetos y se expande a lo largo de este. Si es solido, se aplica en el portaobjetos una gota de solución de NaCl 0,85%, se diluye la porción de cultivo enél y se esparce por todo el portaobjetos, c. ambos se colocan a secar a temperatura ambiente, d. el portaobjetos en el cual s realizo el frotis con medio solido, se flamea sutilmente para fijar la muestra. 2. Se colorea cada preparación de acuerdo a las metodologías proporcionadas en la guía, para tinciones simples y compuestas (Gram, esporas, capsulas y flagelos). 3. Luego de colorear las...
TINCIONES SIMPLES, COMPUESTAS Y OBSERVACION MICROSCOPICA DE BACTERIAS
J. Cardona2 207512, D. Velasquez.1 510565, R. Zuñiga2 111085, J. Garnica1 509517.
Departamento de ciencias biológicas. 1Facultad De Ingeniería Y Administración. 2 Facultad De Ciencias Agropecuarias. Universidad Nacional De Colombia Sede Palmira
RESUMEN
En el laboratorio de microbiología es fundamentalque el personal que realice un trabajo de investigación conozca y aplique los diferentes tipos de tinciones simples o tinciones compuestas. Los objetivos desarrollados en esta práctica de tinciones fueron adquirir destrezas para realización de las mismas en bacterias teniendo en cuenta su funcionalidad y finalidad de la tinción, posteriormente observarlas en el microscopio con el fin de conocerlas ydiferenciarlas por sus aspectos morfológicos. en esta práctica se obtuvieron las bacterias de medios de cultivo solido y liquido, a continuación se realizaron cuatro tinciones que fueron: tinción de flagelos, tinción de capsulas, tinción de gram y tinción de esporas, en las dos últimas utilizando frotis, luego se paso a montar de una en una las cuatro placas en el microscopio de luz hastallegar al objetivo de inmersión con la finalidad de observar y analizar las diferentes características de las bacteria , Gracias a esta práctica se adquirieron destrezas en el momento de realizar una tinción además de conocer sus funciones y finalidades, como también de practica en el uso microscopio, siendo esta práctica de laboratorio muy completa.
Palabras Clave: cromóforo, auxócromo.Introducción
Los microorganismos generalmente son demasiado pequeños y complejos para observarlos a simple vista, además, son incoloros y traslucidos. Cada microorganismo presenta características que lo diferencia de los demás como: nutrición, estructura, tamaño, etc., razón por la cual se recurre a la microscopia, que facilita ostensiblemente su observación, ahora bien uno de los métodos fundamentalespara la observación de estos organismos bajo el microscopio son las tinciones, ya que facilita la observación de ciertas estructuras celulares y permite su diferenciación (Castillo. 2004).
Las tinciones son preparadas en soluciones acuosas y orgánicas de colorantes o grupo de colorantes que le proporcionan una coloración a los microorganismos, las tinciones pueden ser simples o compuestas.Los colorantes son compuestos orgánicos que contienen un grupo benceno que por lo general es incoloro, un grupo cromóforo el cual le confiere el color al benceno, y un auxócromo que le proporciona al cromóforo la capacidad de iniciación, los colorantes también sirven como indicadores de cambio de pH o de oxido-reducción (Rojas. 2011).
Materiales:
Asa bacteriológica, bandejas para tinción,mechero de bunsen, Microscopio compuesto, portaobjetos, azul de metileno, cristal violeta, lugol de gram, alcohol acetona, safranina, verde malaquita, fucsina, cultivos bacterianos en agar, cultivos bacterianos en caldo nutritivo, acido sulfúrico 1%, azul de metileno de Zeehl-Neelsen, reactivo de Hiss, reactivo de Albert, tinta china, colorante de Leifson, solución de fenol 5%, Fucsina carbólica deZeehl-Neelsen, aceite de inmersión.
Métodos
1. Se realiza el frotis a cada una de las láminas de la siguiente forma: a. se limpia la laminilla con alcohol y papel de lentes, b. si es líquido, se colocan dos gotas del cultivo sobre el portaobjetos y se expande a lo largo de este. Si es solido, se aplica en el portaobjetos una gota de solución de NaCl 0,85%, se diluye la porción de cultivo enél y se esparce por todo el portaobjetos, c. ambos se colocan a secar a temperatura ambiente, d. el portaobjetos en el cual s realizo el frotis con medio solido, se flamea sutilmente para fijar la muestra. 2. Se colorea cada preparación de acuerdo a las metodologías proporcionadas en la guía, para tinciones simples y compuestas (Gram, esporas, capsulas y flagelos). 3. Luego de colorear las...
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