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Química Biológica I TP CROMATOGRAFIA de Partición

OBJETIVO:
-Separar mediante cromatografía de partición en papel los hidratos de carbono presentes en
una muestra.
-Separar mediantecromatografía de partición en papel los aminoácidos de una muestra dada.

FUNDAMENTO
La cromatografía en papel se utiliza para compuestos muy polares o polifuncionales. El uso
más común es paraazúcares, aminoácidos y pigmentos naturales. En esta cromatografía se
utiliza el fenómeno de partición en donde la fase estacionaria se halla sobre un soporte activo
(el papel) que en realidad formaparte de la fase estacionaria que es el agua. Las fases móvil y
estacionaria estarán en contacto en una gran interfase, lo que permite una rápida obtención de
una distribución de equilibrio delsoluto entre ellas. Si la muestra problema está formada por
más de un soluto, éstos se separan por sus diferentes coeficientes de partición.
La realización de la cromatografía en papel implica lasiembra de la muestra problema en un
trozo de papel de buena calidad, en general Whatman N°1 para cromatografía analítica, que
luego se introducirá en una cuba de desarrollo de modo que el solvente (fase móvil) ascienda
por capilaridad (técnica ascendente) o descienda por capilaridad y gravedad (técnica
descendente). La fase estacionaria es un complejo celulosa - agua que tiene un poderdiferente
que el del agua pura.

ETAPAS DE LA CROMATOGRAFÍA EN PAPEL

Siembra:
Se aplican muestras en solución a no menos de 1,5 cm del borde inferior de una tira
rectangular de papel, y a nomenos de 1,5 cm de los bordes laterales, manteniendo a su vez,
entre mancha y mancha una distancia no menor de 1 cm. Se hace un toque, se evapora el
solvente, se hace otro toque, tratando deconcentrar la muestra sin superar un diámetro de la
mancha de 3 mm. La siembra es puntual para fines analíticos, y en banda para fines
preparativos.
Desarrollo:
Ascendente: el solvente se...