IDENTIFICACION DE MICROORGANISMOS POR MORFOLOGIA

IDENTIFICACION DE MICROORGANISMOS POR MORFOLOGIA LABORATORIO N° 3

Carolina Serna Marin¹ xxxxxxx, Juliana García Gutierrez¹ xxxxxxx, Limbania Duarte Osorio¹1229404
Tecnología en Ecología y Manejo Ambiental, Facultad de Ingeniería, Universidad del Valle Cali, Colombia

1. Introducción
La coloración de Gram es una de las técnicas más comunes en bacteriología, se utiliza para distinguirentre varios tipos de células bacterianas y clasificarlas en Gram positivas y Gram negativas. La mayor parte de las muestras que contienen cultivos de bacterias son frotadas sobre portaobjetos y son teñidas para posteriormente ser examinadas en el microscopio.
2. Objetivos
Clasificar algunas bacterias en Gram Positivas y Gram negativas.
Comprender los pasos necesarios para realizar una correctacoloración.
Identificar la morfología de las diferentes bacterias por medio de la coloración.
Reforzar los conceptos anteriormente trabajados.
RESULTADOS
Se realizo la coloración de las bacterias Bacillus cereus, Staphylococcus auresus, Escherichia coli, Klebsiella spp y Proteus, posteriormente fueron analizadas en el microscopio óptico a diferentes objetivos para determinar lascaracterísticas y morfología de cada una, los resultados obtenidos en cada una de las coloraciones se mencionan a continuación:
Coloración de Gram positivas:
Placa 1. Staphylococcus auresus
Interpretación de resultados: El diagnostico principal se basa en la morfología, tamaño de la colonia y pigmentación, la coloración de Gram permite clasificar las bacterias sobre la base de la estructura de sus paredescelulares, las bacterias Gram positivas deben presentar una pared celular sana, si la pared sufre algún daño, el organismo se vuelve Gram negativo. Estas bacterias no son solubles en solvente orgánico y esto ayuda a que los poros se cierren y el color cristal violeta se conserve.

Características:
Colonias con pigmentación violeta.
Se observa un gran crecimiento en grupos.
Cocaceas granpositivo agrupadas en racimos irregulares.
No forman esporas.
Presentan forma esférica, puntiformes y de borde definido.
La pared celular posee una capa gruesa de peptidoglicano.
Organismo anaerobio facultativo.





Imagen 1. fotografía de Staphylococcus auresus, coloreada por tinción de Gram. Fuente http://microblogogia.blogspot.com/p/bacteriologia.html

Coloración de Gram negativasPlaca 2. Bacteria Escherichia:
Interpretacion de resultados: El cristal violeta se incorpora en las células bacterianas a través de la pared, el lugol ayuda a solubilizar y permite que el cristal violeta se fije con mayor intensidad de la pared celula bacteiana, los organismos Gram negativos se decoloran a diferencia de los Gram positivos que no lo hacen. El colorante de contraste (Safranina) haceque las células se tornen de color rosado.
Caracteristicas:
Presentan forma de bacilos cortos y no forman esporas.
Se observa de color rosado después de la coloración de Gram.
Organismo anaerobio facultativo.
Presenta colonias agrupadas.
Encargadas de la fermentación de la glucosa y lactosa.






Imagen 2. Fotografía de Escherichia coli, coloreada por tinción de Gram, observada enun microscopio óptico. Fuente http://www.ehu.es/biomoleculas/hc/sugar35b.htm

Coloración de Capsula.
Placa 3. Bacteria Klebsiella spp:
Interpretación de resultados: Para analizar correctamente las características de la bacteria fue necesario realizar el extendido de la bacteria sobre la lámina portaobjetos con una gota de agua y posteriormente fijarla con calor.
La fijación permite generarcambios en la composición físico-química como coagulación de las bacterias, de tal forma que se conserve la estructura que tenía en vida sin deformarse e impida el arrastre de los microorganismos ya que con la fijación estos quedan adheridos al portaobjetos y hace que la pared celular sea más permeable a los colorantes.
Inicialmente se adiciona al extendido un colorante primario de Cristal...