INF 2 1

UST-Viña del Mar
Departamento de Ciencias Básicas
Laboratorio de Bioquímica















Informe Laboratorio N° 2
“Cuantificación de proteínas en solución”
















Introducción:

Lasproteínas ocupan un lugar de máxima importancia entre las moléculas constituyentes de los seres vivos (biomoleculas). Prácticamente todos los procesos biológicos dependen de la presencia o actividad de estetipo de moléculas.
Determinar la concentración de proteínas es una técnica que se utiliza para conocer la actividad de una enzima específica, para el diagnóstico de enfermedades, así como para muchosotros propósitos. Existen diferentes métodos para la cuantificación de proteínas pero no hay uno completamente satisfactorio para medir la concentración de una muestra.
En este trabajo práctico severá dos métodos que se usan corrientemente para medir concentración de proteínas, Biuret y Lowry.


Objetivos:


Aplicar un método colorimétrico para determinar la concentración de proteínas en dosmuestras problemas (mp1 –mp2)
Aprender el manejo del espectrofotómetro y su aplicación en los métodos colorimétricos
Aplicar la técnica de Biuret y lowry para la cuantificación de la concentraciónproteínas en las muestras problemas.


Fundamentos de las técnicas:

Método de biuret:
En este trabajo práctico se utilizó el método de Biuret que se utiliza corrientemente para medir la concentración deproteínas.
El nombre de la reacción procede del compuesto coloreado formado por la condensación de dos moléculas, con la eliminación de amoniaco. Si una solución fuertemente alcalina de sulfato cúprico(CuSO4) se añade a una solución de proteínas se forma un complejo entre el ion Cu2+ y los grupos NH de los enlaces peptídicos, con la aparición de un color violeta- purpura, que presenta el máximo deabsorción a 540 nm.

Método de lowry:
Este método de cuantificación de proteínas tiene dos etapas , la primera , los iones de cu en medio alcalino , se unen a proteínas formando complejos con los...