Infeccion Viral

Infección viral:
o Un requisito previo para una infección exitosa es elagregado de proteasas al medio de infección, de preferencia tripsina o serino proteasas similares, ya que estas proteasasfraccionan extracelularmente al precursor de hemaglutinina [HA0] dando lugar a hemaglutinina activa [HA1 y HA2]. Solamente la hemaglutinina fraccionada lleva a la adsorción de los virus de influenza en lascélulas con la subsecuente asimilación del virus dentro de la célula (Tobita, K. y col., Med. Microbiol. Immunol., 162 (1.975), 9-14; Lazarowitz, S.G. &Choppin, P.W., Virology, 68 (1.975) 426-439) yde este modo a un posterior ciclo de replicación del virus en el cultivo celular. o Se ha encontrado sorprendentemente que replicando los virus de influenza en células infectadas a temperaturasreducidas, los virus obtenidos tienen una eficacia apreciablemente mayor como vacuna que aquellos virus que se obtienen por replicación a 37ºC. La replicación a 37ºC, la temperatura clásicamente usada parareplicación de influenza en cultivo celular, lleva a rendimientos de virus comparativamente altos en un tiempo corto. o La infección de las células cultivadas en suspensión es llevada a cabo, depreferencia, cuando las células en el procedimiento de lote han alcanzado una densidad celular de alrededor de 8 a 25 x 105 células/ml o alrededor de 5 a 20 x 106 células/ml en el sistema de perfusión. Sise usan células de crecimiento adherente, la densidad celular óptima para la infección depende de la línea celular en particular. La infección de las células con virus de influenza es llevada a cabode preferencia a m.d.i. (multiplicidad de infección) de alrededor de 0,0001 a 10, de preferencia de 0,002 a 0,5. o El agregado de una proteasa para lograr dar el fraccionamiento de la proteínaprecursora de hemaglutinina [HA0] y de esta manera permitir la adsorsión de los virus a las células, puede ser llevado a cabo de acuerdo a la invención apenas antes o simultáneamente con la infección de las...