informe 1 microbiolab

Universidad Nacional Agraria la Molina






Titulo: Fijación de una muestra y tinción simple con colorantes básicos


Integrantes:
20120362 , Medina , Eduardo
20121297 , Espinoza Melvi
20111039 , Vallebuona Francesca
, Arévalo Harman Chiara
20110370 , Guevara Oscar

Mesa 4


2015
INTRODUCCION
Las formas bacterianas pueden ser observadas de dos maneras, ya seapor muestras de células vivas o con células muertas teñidas con ciertos colorantes, las bacterias vivas carecen de color en preparaciones acuosas mientras que en muestras previamente teñidas, aumenta su contraste con el medio circundante permitiendo una mejor visualización.
Previo al desarrollo de una técnica de tinción, la muestra bacteriana a ser observada debe ser fijada, es decir añadida a unalámina de vidrio sobre la cual se realizará la tinción.
La mayoría de los colorantes constituyen sales en las cuales uno de los iones presenta color dichos colorantes se dividen en dos grupos: básicos y ácidos. Si el color reside en el ion positivo el colorante se denomina colorante básico como por ejemplo azul de metileno, cristal violeta, verde malaquita y safranina. Si el colore reside en elion negativo se le denomina colorante acido por ejemplo la eosina.
De las diferentes técnicas de tinción, la tinción simple constituye una técnica simple y directa que a través del uso de colorante, nos permite contrastar y diferenciar los microorganismos de su entorno.



OBJETIVOS
Ejecutar una preparación de muestra fija de bacterias para posterior tinción.
Observar las diferentes formas, tamañosy agrupaciones que presentan los microorganismos aplicando un método simple de tinción.






Marco teórico
La mayoría de las bacterias son transparentes, por lo que suele ser necesario recurrir al uso de tinciones si se desea observar a estos seres vivos con un microscopio óptico convencional de campo claro. Las tinciones que hace uso de un solo colorante se denomina tinción simple. Lastinciones más usadas en bacteriología requieren previamente que la muestra en estudio se someta al proceso de fijación. Habitualmente, las muestras bacterianas se preparan para ser observadas en forma de frotis o extensión sobre portaobjetos, lo que se asegura una adecuada separación entre las células y facilita que la tinción posterior se distribuya de manera homogénea. Para hacer frotis o extensión, lasuspensión bacteriana se homogeniza bien, se extiende sobre un portaobjetos y se fija.
Para bacterias, la fijación por el calor es lo más corriente, aunque también puede fijarse con sustancias químicas como formaldehido, ácidos y alcoholes. Después de la fijación, si se añade el colorante, no se producen ulteriores cambios estructurales en el protoplasma. La fijación se realiza habitualmente encélulas que han sido fijadas sobre un portaobjetos, tratando después éste con el agente fijador, y siguiendo inmediatamente el proceso de tinción. La fijación produce habitualmente el encogimiento de las células; la tinción, por el contrario, hace que las células aparezcan mayores que lo que es realmente, de manera que las medidas de las células que han sido fijadas o teñidas no pueden realizarse conmucha precisión.
La fijación como finalidad inmovilizar las células bacterianas sobre el portaobjetos para que no sean arrastradas en los procesos posteriores de teñido y de lavado. Aunque es inevitable que la fijación y posterior tinción cause la muerte de los microorganismos y altere algunas de sus características, un procesamiento adecuado puede minimizar estas alteraciones.
La preparación defrotis bacteriano se realiza de modo distinto dependiendo de si se parte de un cultivo bacteriano líquido o sólido. En ambos casos, una vez preparada la extensión la muestra se puede fijar aplicando color sobre el portaobjetos. Es muy importante no excederse en esta etapa para que las bacterias no se deformen o se lisen. Además, la fijación de bacterias procedentes de medio líquido también...