INFORME 2 COLORACIONES BACTERIANAS
Páginas: 6 (1385 palabras)
Publicado: 29 de septiembre de 2015
PRÁCTICA Nº 02
COLORACIONES BACTERIANAS
COLORACIÓN DE GRAM
OBJETIVOS
Con tinción de azul de metileno, observar las formas bacterianas.
Utilizar la coloración Gram y observar las bacterias al microscopio.
El alumno aplicará una técnica de coloración diferencial para la identificación de bacterias Gram positivas y Gram negativas.
INTRODUCCION
El tamaño de la mayoría de las célulasbacterianas es tal que resultan difíciles de ver con el microscopio óptico. La principal dificultad es la falta de contraste entre la célula y el medio que la rodea, y el medio más simple de aumentar el contraste entre la célula y el medio que la rodea es la utilización de colorantes. Las células generalmente son tratadas para coagular el protoplasma antes de teñirlas, proceso llamado fijación. Despuésde la fijación se realiza habitualmente en células que han sido secadas sobre un portaobjetos, tratando después éste con el agente fijador y siguiendo inmediatamente el proceso de tinción. La mayoría de los colorantes son compuestos orgánicos que tienen alguna afinidad específica por los materiales celulares. Muchos colorantes utilizados con frecuencia son moléculas cargadas positivamente(cationes) y se combinan con intensidad con los constituyentes celulares cargados negativamente, tales como los ácidos nucleicos y los polisacáridos ácidos. Ejemplos de colorantes catiónicos son el azul de metileno, el cristal violeta y la safranina. Otros colorantes son moléculas cargadas negativamente (aniones) y se combinan con los constituyentes celulares cargados positivamente, tales como muchasproteínas. Esos colorantes incluyen la eosina, la fucsina ácida y el rojo Congo.
Hans Christian Joachim Gram
(1853-1938) Microbiólogo y médico danés. La vida e investigación de Gram transcurre en Copenhague, donde fue profesor de patología y terapéutica en la universidad de dicha ciudad. En 1884, durante su viaje a Berlín, diseñó y presentó el método microbiológico de tinción de bacterias que llevasu nombre. Se compone de yodo, yoduro potásico y agua, y permite teñir determinados elementos por contraste con otros o con el fondo. El método de Gram permite clasificar a las bacterias en dos tipos fundamentales, gram positivas y gram negativas. La diferencia entre bacterias gram positivas y gram negativas está en función de si retienen o no el colorante cristal violeta después de una serie detratamientos. Esto permite averiguar qué tipo de pared celular tienen las bacterias. Otros microorganismos también responden a este tipo de tinciones, como por ejemplo las levaduras, que son gram positivas y las rickettsias, que son gram negativas.
Utiliza cuatro elementos:
CRISTAL VIOLETA (COLORANTE)
LUGOL ( MOLIENTE)
ALCOHOL CETONA (DECOLORANTE)
SAFRANINA ( COLORANTE)
La coloración GRAM sirvede orientación.
MATERIALES
Asa de Kolle
Microscopio
Porta objetos
Cultivo de Staphylococcus aureus
Cultivos de Escherichia coli
Cultivo de Candida albicans
Aceite de inmersión
Cristal violeta
Alcohol acetona
Safranina
Lugol para Gram
PROCEDIMIENTO
1. Se calienta el asa de siembra para poder eliminar losmicroorganismos.
2. Se saca la muestra de la boca de una persona.
3. Se coloca en una porta lámina mesclada con un poco de agua destilada.
4. Se realiza el frotis o extensión
5. Se hace la fijación (se pasa la porta lamina por encima del mechero con el fin de que el agua se evapore).
6. Coloración
7. En primer lugar se echa el cristal violeta, lo dejamos actuar por un minuto.8. Luego echamos el lugol, de igual manera lo dejamos actuar por un minuto.
9. Colocamos el alcohol cetona por un minuto también.
10. Finalmente colocamos la safranina por 30 segundos
OBSERVACIÓN DE LA MUESTRA
En primer lugar observamos otras muestras que son de secreción vaginal
En la cual encontramos:
Una célula epitelial
Bacilos
Es GRAM +
Luego observamos un...
PRÁCTICA Nº 02
COLORACIONES BACTERIANAS
COLORACIÓN DE GRAM
OBJETIVOS
Con tinción de azul de metileno, observar las formas bacterianas.
Utilizar la coloración Gram y observar las bacterias al microscopio.
El alumno aplicará una técnica de coloración diferencial para la identificación de bacterias Gram positivas y Gram negativas.
INTRODUCCION
El tamaño de la mayoría de las célulasbacterianas es tal que resultan difíciles de ver con el microscopio óptico. La principal dificultad es la falta de contraste entre la célula y el medio que la rodea, y el medio más simple de aumentar el contraste entre la célula y el medio que la rodea es la utilización de colorantes. Las células generalmente son tratadas para coagular el protoplasma antes de teñirlas, proceso llamado fijación. Despuésde la fijación se realiza habitualmente en células que han sido secadas sobre un portaobjetos, tratando después éste con el agente fijador y siguiendo inmediatamente el proceso de tinción. La mayoría de los colorantes son compuestos orgánicos que tienen alguna afinidad específica por los materiales celulares. Muchos colorantes utilizados con frecuencia son moléculas cargadas positivamente(cationes) y se combinan con intensidad con los constituyentes celulares cargados negativamente, tales como los ácidos nucleicos y los polisacáridos ácidos. Ejemplos de colorantes catiónicos son el azul de metileno, el cristal violeta y la safranina. Otros colorantes son moléculas cargadas negativamente (aniones) y se combinan con los constituyentes celulares cargados positivamente, tales como muchasproteínas. Esos colorantes incluyen la eosina, la fucsina ácida y el rojo Congo.
Hans Christian Joachim Gram
(1853-1938) Microbiólogo y médico danés. La vida e investigación de Gram transcurre en Copenhague, donde fue profesor de patología y terapéutica en la universidad de dicha ciudad. En 1884, durante su viaje a Berlín, diseñó y presentó el método microbiológico de tinción de bacterias que llevasu nombre. Se compone de yodo, yoduro potásico y agua, y permite teñir determinados elementos por contraste con otros o con el fondo. El método de Gram permite clasificar a las bacterias en dos tipos fundamentales, gram positivas y gram negativas. La diferencia entre bacterias gram positivas y gram negativas está en función de si retienen o no el colorante cristal violeta después de una serie detratamientos. Esto permite averiguar qué tipo de pared celular tienen las bacterias. Otros microorganismos también responden a este tipo de tinciones, como por ejemplo las levaduras, que son gram positivas y las rickettsias, que son gram negativas.
Utiliza cuatro elementos:
CRISTAL VIOLETA (COLORANTE)
LUGOL ( MOLIENTE)
ALCOHOL CETONA (DECOLORANTE)
SAFRANINA ( COLORANTE)
La coloración GRAM sirvede orientación.
MATERIALES
Asa de Kolle
Microscopio
Porta objetos
Cultivo de Staphylococcus aureus
Cultivos de Escherichia coli
Cultivo de Candida albicans
Aceite de inmersión
Cristal violeta
Alcohol acetona
Safranina
Lugol para Gram
PROCEDIMIENTO
1. Se calienta el asa de siembra para poder eliminar losmicroorganismos.
2. Se saca la muestra de la boca de una persona.
3. Se coloca en una porta lámina mesclada con un poco de agua destilada.
4. Se realiza el frotis o extensión
5. Se hace la fijación (se pasa la porta lamina por encima del mechero con el fin de que el agua se evapore).
6. Coloración
7. En primer lugar se echa el cristal violeta, lo dejamos actuar por un minuto.8. Luego echamos el lugol, de igual manera lo dejamos actuar por un minuto.
9. Colocamos el alcohol cetona por un minuto también.
10. Finalmente colocamos la safranina por 30 segundos
OBSERVACIÓN DE LA MUESTRA
En primer lugar observamos otras muestras que son de secreción vaginal
En la cual encontramos:
Una célula epitelial
Bacilos
Es GRAM +
Luego observamos un...
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