informe de biologia molecular

INFORME DE BIOLOGIA MOLECULAR
EXTRACCION DE ADN GENOMICO DE MOSQUITO (METODO SIN FENOLES)




ACOSTA LOZANO GREICY
MÓRELO FLÓREZ WANDA
NUÑEZ CASTRO DANILO
REY SIERRA KATTYPROFESORA
MARIA PAULINA AYCARDY MORYNELLI




UNIVERSIDAD DE CÓRDOBA
FACULTAD DE CIENCIAS BASICAS
PROGRAMA: BIOLOGIA
VII SEMESTRE
2013-II

OBJETIVOS
OBJETIVO GENERAL
Extraer el ADN genómicovegetal
OBJETVOS ESPECIFICOS
1. Identificar los procesos que se llevan a cabo durante la extracción de ADN genómico
2. Observar las diferencias entre ADN genómico vegetal y animalMETODOLOGIA
MATERIALES Y REACTIVOS
Tubos eppendorf
Micropipetas
Pinzas
2 mosquitos
Incubadora
Bisturí
Isopropanol
Etanol al 70%
Centrifuga
Macerador pequeño
Baño de maríaVortex
Buffer lisis
Acetato de potasio
Etanol absoluto
Buffer TE
Hielo











PROCEDIMIENTO
Con la ayuda de un bisturí se hizo la disección de las patas, las y la cabeza de unmosquito, luego se colocaron la zona abdominal, las patas y las alas del mosquito en un tubo eppendorf de 1.5 mL, al cual se le agregaron 50µl de buffer lisis cuya función fue la de homogenizar lamuestra, posteriormente se macero la muestra en el tubo con un macerador pequeño. Luego de esto, se incubo la muestra a 65°C por 35 minutos. Después se le adicionaron a la muestra 15µl de acetato depotasio y se mezcló lentamente por inversión y se llevó a incubación durante 1 hora en hielo.

Luego de la incubación se centrifugo la muestra a 13000 r.p.m por 15 minutos a 4°C, posteriormente sepasó el sobrenadante a un nuevo tubo y se descartó el tubo anterior, a este se le agregaron 100µl de etanol absoluto y se mezcló suavemente por inversión y la muestra se dejó a temperatura ambiente por 5minutos. Luego de esto se centrifugo a 13000 r.p.m por 5 minutos; después el sobrenadante se descartó y se dejó secar el pellet por 20 minutos para después agregarle 150µl de buffer TE por 10...