Informe De Espectrofotometria
INSTRUMENTACIÓN Y METROLOGÍA I
ESCUELA DE MICROBIOLOGÍA
UNIVERSIDAD DE ANTIOQUIA
2012
OBJETIVOS
* Aprender a usar de forma adecuada el espectrofotómetro.
*Medir la absorbencia de tres soluciones coloreadas en todas las longitudes de onda permitidas por el equipo.
* Realizar las mediciones necesarias para evaluar la exactitud y precisión delespectrofotómetro, mediante la realización de los cálculos respectivos.
* Evaluar es comportamiento del espectrofotómetro a través del tiempo, haciendo pruebas de estabilidad fotométrica.
INTRODUCCIÓNLa espectrofotometría es el estudio de la energía transmitida, absorbida y reflejada en una superficie dada, en función de la longitud de onda (λ); se basa en el análisis químico de sustanciaspara medir su concentración, aprovechando la capacidad que éstas tienen para formar complejos coloreados.
Hay diferentes longitudes de onda a las cuales se puede absorber una concentración y un colorespecifico, ya que la luz absorbida no solo depende de la concentración, sino también del color de la solución.
La espectrofotometría tiene como principio químico la ley de Bourguer- Lambert-Beer, la cual establece que la absorbancia de una solución depende tanto de la concentración como de la trayectoria que recorre la luz, es decir que entre más concentrada este la solución y mastrayectoria tenga que recorrer la luz, la solución va a tener mayor absorbancia y la luz transmitida va a ser menor.
Cada solución tiene una longitud de onda óptima, la cual es el punto donde se absorbela mayor cantidad de luz; ésta se hace mediante la realización de una curva espectral y consiste en medir la absorbencia de la solución, sometiendo ésta a todas las longitudes de onda que permita elespectrofotómetro.
En la espectrofotometría se pueden realizar varias pruebas, entre ellas está la realización de la curva espectral, explicada anteriormente; el control de exactitud del...
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