informe N 2 bioquimica




UNIVERSIDAD DE ORIENTE NUCLEO BOLIVAR
ESCUELA DE CIENCIAS DE LA SALUD DEPARTAMENTO DE CIENCIAS FISIOLOGICAS
CATEDRA: BIOQUIMICA














PRATICA 2
“SALADO” (SALTING OUT) DE PROTEINAS, SU APLICACIÓN EN LA SEPARACION Y DETERMINACION DE ALBÚMINA Y GLOBULINAS EN SUERO O PLASMA SANGUINEO.













Docente:Bachilleres:
Dr. Miguel Basanta Quintana Emely C.I 19.911.596
Peralta María C.I 22.880.638
Zoimar Lezama C.I 20.886.777
Oswald Hernández C.I 22.880.724
Felipe Vera C.I 21.497.791












Ciudad Bolívar, Mayo del 2014.
Introducción.


Las proteínas son macromoléculas complejasdesde los puntos de vista físico y funcional, que desempeña múltiples funciones de importancia crucial. Están sujetas a cambios físicos y funciones que reflejan el siglo de vida de los organismos en los cuales residen.

Las proteínas son compuestos constituidos por aminoácidos unidos por enlaces peptídicos. Son moléculas de elevado peso molecular. Según su composición las proteínas se dividenen: Simples y Conjugadas, se producen por hidrólisis de aminoácidos y otros componentes orgánicos e inorgánicos. Existen millones de proteínas en nuestro cuerpo que efectúan funciones específicas, como la de trasporte de gases catalíticos, de protección, etc.

Estas se pueden clasificar de acuerdo a su solubilidad en Albúminas, Globulinas, Histonas, Protaminas y Escleroproteínas. En la presentepráctica se utilizan para estudio Albúmina y Globulinas, en cuanto a la Albúmina se puede acotar que pueden precipitarse de sus soluciones con altas concentraciones de sales proceso que se denomina salinización.

Para estudiar una proteína es necesario separarla utilizando diferentes métodos que se basan en las diferentes solubilidades de las proteínas ocasionadas por el PH(precipitación isoeléctrica), la polaridad (precipitación con etanol o acetona) o la concentración salina (mediante la adición de sulfato de amonio). (Harper, 2007)

Las sales neutras ejercen efectos pronunciados sobre la solubilidad de las proteínas globulares. A baja concentración, las sales incrementan la solubilidad de muchas proteínas, fenómeno que recibe el nombre de “salting in”. Por otra parte, amedida que la fuerza iónica aumenta, la solubilidad de una proteína comienza a disminuir y por lo tanto la proteína puede ser casi completamente precipitada de su disolución, efecto llamado “salting out”.

Se considera importante describir a la albúmina, por ser ésta la proteína a separar durante la actividad práctica por el método antes mencionado. Es un tipo de proteína simple, compuesta decarbono, hidrógeno, oxígeno, nitrógeno y un pequeño porcentaje de azufre. La albúmina es coagulable por el calor, los ácidos minerales, el alcohol y el éter, y es soluble en agua y en disoluciones diluidas de sal. Está presente en tejidos animales tales como la clara de huevo, la leche y el músculo, además de encontrarse en el plasma sanguíneo.
Resultados


Se presenta una tabla de datos la cualcontiene los resultados obteni dos durante la precipitación de proteínas por medio del método de “Salting Out”, realizado en la práctica del laboratorio para la cuantificación de las proteínas.

TABLA Nº 1.
























Fuente: guía de laboratorio de bioquímica.


1º. Curva de calibración utilizando la lectura de los tubos 3 al 6 en absorbancia contra mg de proteínacontenidos en cada uno de los mismos.

Para calcular los mg de proteínas en los tubos 3, 4, 5 y 6 se parte del estándar de proteínas a concentración 8mg/ml, en el que se halla 8mg de proteínas en 1ml de solución, así el cálculo se realiza mediante una simple regla de tres utilizando los ml de solución para cada uno de los tubos, presentados en la tabla anterior. El procedimiento se...