Inmovilizacion de la amilasa

Inmovilización de la a-amilasa de Bacillus amyloliquifaciens TSWK1-1 para las propiedades mejoradas biocatalıticas y la tolerancia disolvente
Resumen: La a-amilasa de Bacillus amyloliquifaciens TSWK1-1 (Número GenBank, GQ121033) fue inmovilizado por varios métodos, incluyendo la unión con celulosa DEAE, acoplamiento covalente con la gelatina y atrapamiento en poliacrilamida y agar iónico. Lainmovilización de la enzima purificada era más eficaz con la celulosa DEAE seguido por gelatina, agar y poliacrilamida. Los km aumentó, mientras que Vmax disminuyó tras la inmovilización sobre diversos soportes. Los perfiles de temperatura y pH ampliaron, mientras termoestabilidad y pH esta- bilidad mejorada después de la inmovilización. La enzima inmovilizada exhibía una mayor actividad endiversos tensioactivos no iónicos, tales como Tween-20, Tween-80 y Triton X-100 y el tensioactivo iónico, SDS. Del mismo modo, la mayor estabilidad del inmovilizado a-amilasa en diversos disolventes orgánicos estuvo entre las características más atractivas del estudio. Se evaluó la capacidad reutilizable de la enzima inmovilizada en términos de estabilidad operativa. La celulosa DEAE inmovilizadoa-amilasa retuvo su actividad inicial incluso después de 20 ciclos de frecuencias. La enzima inmovilizada de celulosa DEAE hidrolizado de almidón con 27% de eficiencia. En resumen, la inmovilización de B. amyloliquifaciens TSWK1-1 a-amilasa con celulosa DEAE apareció más adecuado para las propiedades mejoradas biocatalıticas y estabilidad.
Palabras clave A-amilasa inmovilización DEAE celulosa.Termoestabilidad tolerancia Disolvente estabilidad operacional
Introducción
Las bacterias termófilas pueden crecer y producir industrialización compuestos valioso aliado de manera óptima a altas temperaturas [1]. La capacidad de crecer a altas temperaturas está asociada con la estabilidad de las macromoléculas. Las enzimas termófilas podrían proporcionar modelos potenciales para la comprensión de latermoestabilidad. Los procesos termófilos son estables, rápido y menos costoso, lo que conduce finalmente a la actividad y la recuperación del producto mejorada [2, 3]. Las amilasas hidrolizan el almidón para formar diversos productos, que incluyen dextrina y polímeros sucesivamente más pequeños de la glucosa [4]. Los comprende una amilasa (EC3.2.1.1) de la familia de un grupo de enzimas con unavariedad de diferentes especificidades que actúan sobre un sustrato, que contiene residuos de glucosa unidos a través de un-1-1, A-1-4, una -1-6, enlaces glicosídicos [5, 6]. Se comparte aproximadamente 30% de la demanda del mercado enzima [5], con aplicaciones potenciales en la licuefacción de almidón, fabricación de maltosa, fructosa que contiene altos jarabes (HFC), oligosacáridos mezclas,jarabes maltotetrose, altas dextrinas-ramificado de peso molecular, en el eliminación de almidón sizer de textiles, la fermentación directa de almidón en etanol y en el tratamiento de aguas residuales de procesamiento de almidón [7]. Las a-amilasas termoestables de otros Bacillus sp. con bastante buena actividad y la estabilidad a altas temperaturas también son reportados [8-12]. En general, lasa-amilasas termoestables se consideran dependientes de calcio en la naturaleza. Sin embargo, la demanda de calcio-independiente a-amilasa en las industrias de almidón es cada vez mayor.
La inmovilización de células microbianas [13] o de la enzima [14-19 ] es un enfoque de maximización de valor para la aplicación eficiente, mejor calidad y mejores aplicaciones en las industrias. Las ventajas deinmovilización de enzimas incluyen enzimas re-utilización, estabilidad mejorada, fácil la separación de la mezcla de reacción y aplicaciones listas en los procesos continuos automatizados [20]. Los factores que afectan el rendimiento de la inmovilización de la enzima son principalmente, el tipo de enzima y portador utilizado, el tipo de método de inmovilización usado, la concentración de enzima, la...