inmunoprecipitacion

Proteína inmunoprecipitación complejo
La inmunoprecipitación de los complejos de proteínas intactas se conoce como co-inmunoprecipitación. Obras Co-IP mediante la selección de un anticuerpo que sedirige a una proteína conocida que se cree que es un miembro de un complejo más grande de proteínas. Al dirigirse a este miembro conocido con un anticuerpo que puede llegar a ser posible tirar de todoel complejo de proteína de la solución y de ese modo identificar a los miembros desconocidos del complejo.
Esto funciona cuando las proteínas implicadas en el complejo se unen entre sí fuertemente,por lo que es posible tirar de múltiples miembros del complejo de la solución mediante enganche en un miembro con un anticuerpo. Este concepto de tirar de los complejos de proteínas de la solución serefiere a veces como un "pull-down". Co-IP es una poderosa técnica que es utilizada regularmente por los biólogos moleculares para analizar las interacciones proteína-proteína.
La identificación delos miembros de complejos de proteínas puede requerir varias rondas de precipitación con diferentes anticuerpos para un número de razones:
Un anticuerpo particular, a menudo selecciona unasubpoblación de su proteína diana que tiene el epítopo expuesto, dejando así de identificar las proteínas en los complejos que ocultan el epítopo. Esto se puede ver en que rara vez es posible para precipitar nila mitad de una proteína dada a partir de una muestra con un solo anticuerpo, incluso cuando se utiliza un gran exceso de anticuerpo.
La primera ronda de IP a menudo se traducirá en la identificaciónde muchas nuevas proteínas que son miembros putativos del complejo está estudiando. El investigador entonces obtener anticuerpos que atacan específicamente una de las proteínas recientementeidentificadas y repetir todo el experimento de inmunoprecipitación. Esta segunda ronda de precipitación puede dar lugar a la recuperación de nuevos miembros adicionales de un complejo que no fueron...