instrumental

7.3 DETERMINACION DE VITAMINA A POR ESPECTROSCOPÍA UV-VIS

ALCANCE

El método es aplicable para determinar Vitamina A en muestras Straight en Vitaminas: A500, A1000, A/D3 1000/200.PRINCIPIO

Se basa en la saponificación del aceite (acetato o palmitato) con Hidróxido de Potasio, la extracción con éter etílico, y la medición de la absorbancia de luz ultravioleta a través de unadilución con Isopropanol puesta en una celda de cuarzo a una longitud de onda de 325 nm.

TIEMPO REQUERIDO

2 horas para una muestra por triplicado.

REACTIVOS Y MATERIALES

Refrigerantes parareflujo
Espátula de acero inoxidable
Matraces redondos de fondo plano y entrada esmerilada 24/40 de 125 ml
Matraces volumétricos de 100 y 250 ml color ámbar
Embudos de separación con llave de teflón de250 ml color ámbar
Pipetas volumétricas de 5, 10 y 25 ml
Probetas de 50 y 250 ml
KOH acuoso 9/10 solución (P/P)
Eter Etílico grado p.a.
2-propanol (Isopropanol) grado espectrofotométrico
Etanolgrado p.a.
Nitrógeno grado industrial
Agua destilada o desionizada
Cloruro de Sodio grado p.a.
Celdas de Cuarzo para espectrofotómetro de 10 mm de espesor.

Instrumentos y equipo

Balanzaanalítica con precisión 0.1 mg
Espectrofotómetro UV-VIS rango 190 - 750 nm
Mantillas de calentamiento
Unidad de control de temperatura (por Ej. baño Haake)
Campana de extracción

Descripción de laactividad (Realizar por triplicado)

1. Para Vitamina A con nivel esperado de 500,000 a 600,000 UI/g, pesar con precisión de 0.1 mg una cantidad entre 45 - 55 mg de la muestra en un matraz redondode 125 ml.
Para Vitamina A con nivel esperado de 1’000,000 a 1’200,000 UI/g pesar con precisión de 0.1 mg una cantidad entre 20 – 30 mg de la muestra en un matraz redondo de 125 ml.

2. Adicionarcon pipeta volumétrica 25 ml de etanol dejándolo resbalar por las paredes del matraz.

3. Adicionar 3 ml de KOH solución 9/10.

4. Adicionar con pipeta volumétrica 5 ml de Etanol dejando...