Ivy Widjajapdf

Ivy Widjaja, la tailandesa menospreciada

A protein phosphatase 2C, responsive to the bacterial effector
AvrRpm1 but not the AvrB effector, regulates defense
responses in Arabidopsis
Antes de comenzar, quiero decir unas palabras en defensa de esta wna, ella fue la primera en
hacer el análisis proteómico y la caracterización de la interacción "gen-por-gen" avrRpm1RPM1, por eso hizo este paper queal parecer es basura, porque tenía un fin mucho más
grande y hermoso. Eso. A lo nuestro.
Introducción:
Hacen un hermoso resumen de cómo ocurre la respuesta a patógenos. Léanlo si les da el
tiempo.
Resultados:
En un paper anterior (Widjaja 2009), se hizo una identificación de los componentes
relacionados a la vía de señalización AvrRpm1-RPM1, encontraron una fosfatasa PP2C
codificada por At2g20630y la renombraron PIA2 (por PP2C inducida por AvrRpm1). Esta
fosfatasa no es detectable normalmente en las plantas, su concentración es muy baja. Pero
una hora después de la expresión de AvrRpm1 se acumula mucho, por lo que sugiere que PIA1
tiene un rol importante en la señalización cuando un patógeno ataca.

Figura 1:

Figure 1. PP2C up-regulation after dexamethasone treatment in theRPM1 line,but not the rpm1-3 line. Panels of
selected regions of two-dimensional electrophoresis gels showing the PP2C spot (indicated by arrows) before and after
dexamethasone treatment (2 hpi) in Rubisco-depleted total protein (a) and Rubisco-depleted microsomal protein (b)
fractions. The peptide mass-fingerprinting-based identification of the PP2C spot (renamed PIA1) is shown in Figure S1

Objetivo:Estudiar la regulación de PP2C en distintas líneas mutantes.
Materiales y métodos: Tienen dos líneas mutantes de Arabidopsis: Sobreexpresora de Rpm1
(RPM1) y otra mutada para Rpm1 (rpm1-3), ambas con un promotor que se activa en
presencia de dexametasona. Realizan una electroforesis de dos dimensiones (esa de los spots),
sin expresar (sin dexametasona) y con dexametasona en dos extracciones: una deproteínas
totales y otra de proteínas microsomales (organelos) después de haber empobrecido la
expresión de RubisCo (porque es muy abundante y no deja ver las otras).
Resultados: Las flechas señalan el spot de PP2C. Antes del tratamiento con dexametasona no
se observa ningun spot en ninguna de las dos extracciones (control). Después del tratamiento,
se observan spots en la sobreexpresora pero no en lamutada (en ambas extracciones).
Conclusión: La acumulación de PP2C (que ahora es PIA1) es inducida específicamente por
Rpm1.
Figura suplementaria 1: Son los resultados del MALDI-TOF, todos estos resultados se hicieron
en el anterior paper de Widjaja.

Figura 2:

Figure 2. Only Pto DC3000 (avrRpm1) infiltration led to PIA1 accumulation. (a) Selected regions from twodimensional electrophoresisgels showing PIA1 (indicated by arrows) before (UT, untreated) and 2 h after infiltration with
MgCl2, flg22 (10 μM), a type III secretion system mutant (hrpA-), virulent Ptostrain (DC3000), or various avirulent strains
8

−1

expressing the indicated avrgenes at 10 cfu ml . (b) Time course of PIA1 accumulation after PtoDC3000 (avrRpm1)
infiltration.

Objetivo: Estudiar si otros factores estáninvolucrados en la acumulación de PIA1.
Materiales y métodos: (a) Infiltraron Arabidopsis de tipo silvestre con MgCl2 (control),
PtoDC3000 (avrRpm1) para comparar, y otros efectores (Pto DC3000 (avrB), que también
activa resistencia mediada por RPM1, Pto DC3000 (avrRpt2) que activa la resistencia mediada
por RPS2, Pto DC3000, Pto DC3000 (hrpA-) y flg22). UT es sin tratamiento (control).
Resultados: PIA1se acumula sólo en respuesta a avrRpm1 y no a otros, nisiquiera con avrB
que actúa sobre la misma proteína de resistencia. En (b) observa que a las 2 horas de la
infección PIA1 está acumulado, y esa acumulación va disminuyendo horas después.
Conclusión: PIA1 se acumula sólo en respuesta a avrRpm1 y su acumulación disminuye al pasar
las horas (después de la infección).

Figura 5:

Figure 5. Loss...