La Coloracion De Gram

La coloración de Gram es un tipo de tinción diferencial empleado en Bacteriología para la visualización de bacterias, sobre todo en muestras clínicas. Debe su nombre al bacteriólogo danés ChristianGram, que desarrolló la técnica en 1884. Se utiliza tanto para poder referirse a la morfología celular bacteriana como para poder realizar una primera aproximación a la diferenciación bacteriana,considerándose Bacteria Gram positiva a las bacterias que se visualizan de color moradas y Bacteria Gram negativa a las que se visualizan de color rosa o rojo o grosella.
METODOLOGIA
* Recogermuestras.
* Hacer el extendido en espiral.
* Dejar secar a temperatura ambiente o fijarlas utilizando un mechero.
* Fijar la muestra con metanol durante un minuto o al calor (flameado 3 vecesaprox.)
* Agregar azul violeta (cristal violeta o violeta de genciana) y esperar 1 minuto. Todas las células gram positivas y gram negativas se tiñen de color azul-púrpura.
* Enjuagar con agua.* Agregar lugol y esperar entre 1 minuto.
* Enjuagar con agua.
* Agregar acetona y/o alcohol y esperar de 8 a 15 segundos aproximadamente (parte crítica de la coloración).
* Enjuagarcon agua.
* Tinción de contraste agregando safranina o fucsina básica y esperar 45 segundos. Este tinte dejará de color rosado-rojizo las bacterias Gram negativas.
TECNICAS DE COLORACION GRAMFijar un frotis
* Con la ayuda de un mechero, flamear un asa bacteriológica y esperar que enfríe un poco.
* Tomar el asa (previamente flameada) y con ésta tomar un poco de muestra.
* Una vezobtenida una pequeña cantidad de la muestra (con el asa), hacer que ésta tenga contacto con una lámina portaobjetos, la cual servirá para depositar la muestra contenida en el asa.

* Con el asa(conteniendo la muestra) sobre la lámina portaobjetos, proceder a realizar la extensión de la muestra en el portaobjetos mediante movimientos giratorios (dar vueltas con el asa) sobre la lámina, de...