Laboratorio 2 Final









Laboratorio N°2 de Biología Celular
“Reconocimiento de moléculas orgánicas”







Nombres:
Isabel Arends A
Stephanie Cárdenas O.
Palmira Rosas
Docentes:
Alex Elías B.
Yamil Ortega
Introducción.
Todo ser vivo, está constituido por células; ya sea un individuo complejo como los pluricelulares o un individuo completo constituido solo por una célula.
Estás células se clasifican en dosgrupos, las eucariontes y las procariontes pero ambas se asemejan en su composición, están constituidas por las biomoléculas. [1]
Las biomoléculas tienen presente seis elementos: Carbono, Hidrogeno, Oxigeno, Nitrógeno, Fosforo, Azufre; representan el 99% de la masa de la célula.
Se clasifican en cuatro grandes grupos: Carbohidratos, Lípidos, Proteínas y Ácidos Nucleicos.
Para poder estudiarlos yreconocerlos se utilizan diversas técnicas químicas, estas son reactivo de Biuret para el reconocimiento de proteínas, reactivo de Lugol para conocer carbohidratos complejos (almidón), Fermentación alcohólica para carbohidratos simples, insolubilidad en solventes inorgánicos (lípidos) y saponificación.

Procedimiento Experimental.
Etapas:
Paso N° 1
Para el reconocimiento de albúmina se procede aseleccionar 3 tubos de ensayos previamente lavados y secos, estos se introducen a una gravilla de 3 columnas y tres filas; luego se procede a añadir correspondiente a la primera columna con los tubos de ensayo 2 mL de solución a investigar, por consiguiente a estos tubos correspondientes a la columna se le añade 2 mL de Reactivo de Biuret respectivamente agitando suavemente cada uno.
Paso N° 2
Para elreconocimiento de carbohidratos complejos, en éste caso almidón se procede a hacer lo mismo con la columna número dos con los tres tubos de ensayos agregando a cada tubo con un gotario cinco gotitas de Lugol se agita suavemente, esto se deja reposar para poder observar los resultados.
Paso N° 3
Para el reconocimiento de carbohidratos simples en este caso la glucosa se toma un tubo de hemólisislimpio y seco se divide en dos partes iguales se agrega una suspensión de levaduras hasta la mitas del tubo y luego la otra mitad con la solución problema, se llena hasta el borde, luego se tapa con un frasco de penicilina tratando de que no penetre aire al tubo y se invierte, esta solución se incuba a 37° Celsius en un termorregulador durante 20 minutos, se retira observando el resultado.



PasoN°4
Para el reconocimiento de lípidos (insolubilidad en solventes inorgánicos) se procede a agregar a un tubo de ensayo previamente limpio y seco 2 mL de agua bidestilada y 2 mL de aceite, esta solución se agita enérgicamente hasta obtener una emulsión en espera de resultado.
Paso N°5
Para el reconocimiento de ácidos grasos (saponificación), se toma un tubo de ensayo previamente limpio y seco sele añade 2 mL de aceite y 2 mL de Hidróxido sódico al 20%(Naoh20%); esta solución se agita enérgicamente y se lleva a baño maría en un termorregulador durante veinte minutos, luego de trascurrido el tiempo se retira observando el resultado.

Resultados.
En el primer experimento de reconocimiento de proteínas y lípidos se pudo observar claramente como las sustancias problemas que inicialmente erantransparente comenzaron a cambiar su tonalidad.
La sustancia problema número 3, casi en el instante de verter el Reactivo de Biuret, se produjo una coloración violácea, la solución1 y 2 no se produjo cambio alguno. [Anexo 1]
Posteriormente se vertió el Reactivo de Lugol, en el tubo de ensayo con la solución número 1, luego de agitarla levemente se tornó de un color violeta oscuro casi llegando auna tonalidad negra. [Anexo 2]
En el siguiente experimento de reconocimiento de carbohidratos, simples después de los 20 minutos en el termorregulador el tubo de hemolisis que contenía levadura y la sustancia problema comenzó a reaccionar, aumentó su volumen, se formaron múltiples burbujas de gas hasta de llegar al punto de expulsar el tubo de hemolisis del frasco de penicilina. [Anexo 3]
En el...