laboratorio aislamiento de microorganismos

Materiales y métodos
Preparación Medio de cultivo
Materiales
Erlenmeyer de 250 ml
Probeta
Estufa
Agar (en polvo)
Cajas de petri vacias
Tubos de ensayo
Agua destilada
Metodología
Se introdujo de una probeta 123 ml de agua destilada a un erlenmeyer de 250 ml para mezclar con 3.444gr de agar en polvo.
Se dejó la mezcla del erlenmeyer en una estufa a 140ºC hasta que la mezcla tornara translucida.Se dejó enfriar la mezcla
Se introdujo el agar líquido los tubos de ensayo.
Aislamiento de Microorganismos
Materiales
Cajas de petri con agar nutritivo
Cajas de petri vacías y estériles
Tubos de ensayo con 9 Ml de agua peptonada
Tubos de ensayo con agar nutritivo findido y enfriado a 45ºC
Tubos de ensayo con gar nutritivo inclinado
Asa
Pipeta de 1 ml
Cultivo mixto con S.aereus y bacillussubtilis
Cultivo puro de S.aereus


Metodología
Se introdujo cultivo mixto en el tubo de ensayo # 1 que contiene agua peptonada como en los otros 3 tubos restantes.
Con una pipeta se añadió el cultivo del tubo 1 en una caja petri sin agar, después se trasvasó con esa misma pipeta cultivo del tubo #1 al tubo #2. Se repitió este proceso para los 4 tubos.
Luego de trasvasar el cultivo de cada tuvo a cadacaja petri, se introdujo el agar líquido para que solidificara.
Para observar las colonias se incubó durante 48 horas.
Siembra por estrías

Figura 1. Técnica de siembra por estrías. (Tortora, et al. 2007)
Se tomó cultivo mixto con un asa para hacer rayados tenues sobre un costado de la caja petri con agar, se flameó el asa, luego se rozó el asa con el rayado inmediatamente hecho para volver a rayarsuavemente a 90º del rayado anterior, este proceso se hizo sobre 4 costados en la caja como se muestra en la figura 1.
Se incubó por 48 horas


Sembrado por aislamiento
Con un asa previamente esterilizada, se tomó cultivo mixto para rayar por agotamiento sobre una caja petri con agar.
Se incubó por 48 horas
Sembrado en agar inclinado
Se diluyó horizontalmente en un tubo de ensayo agar líquidopara su posterior solidificación.
Con un asa previamente esterilizada, se hizo un rayado con ciultivo puro en movimiento de zig-zag en el tubo con agar inclinado.
Se incubó por 48 horas
Siembra en tubo de ensayo vertical
Se introdujo verticalmente en un tubo de ensayo agar líquido para su posterior solidificación.
Se esterilizó un asa, luego se tomó cultivo puro para punzar el agar con el asa.Para observar las colnias, se incubó 48 horas
Siembra en caldo nutritivo
Se tomó cultivo puro con un asa previamente esterilizada para introducirla dentro del caldo nutritivo
Se dejó por 48 horas incubando para observar colonias
Cuestionario
1)La Peptona es una mezcla compleja de productos de la hidrólisis de proteínas derivadas de la caseína, de carne o de plantas, obtenida por acción de diversosfermentos, especialmente la pepsina y la pancreatina (Microbiología de alimentos. 2005.)

Se presenta como un polvo amorfo, o bien como escamas o masas irregulares, esponjosas, de color blanco amarillento o amarillo parduzco; con olor característico que recuerda al de la carne asada; de sabor amargo (peptona pancreática) o amargo y salado (peptona pépsica). Es muy higroscópica y por tanto sealtera con facilidad en contacto con aire húmedo.
Existen dos tipos de peptona:
Peptona pépsica, obtenida a pH 2 por acción de la pepsina.
Peptona pancreática, obtenida a pH 8 por acción de la pancreatina.

Ambas están constituidas por mezclas de polipéptidos de diversos pesos moleculares, entre lo que se encuentran proteasas, peptonas, polipéptidos y aminoácidos libres. (Microbiología de alimentos.2005)
El Agar es un elemento solidificante muy empleado para la preparación de medios de cultivo. Se licúa completamente a la temperatura del agua hirviendo y se solidifica al enfriarse a 40 grados. Con mínimas excepciones no tiene efecto sobre el crecimiento de las bacterias y no es atacado por aquellas que crecen en él.

El Agar, Químicamente es un polímero de subunidades de galactosa; en...