LABORATORIO BIOQUÍMICA Integración
Páginas: 4 (763 palabras)
Publicado: 1 de octubre de 2015
LABORATORIO BIOQUÍMICA
INTEGRACIÓN 12 – 05 – 2015
Lípidos: Macromoléculas heterogéneas simples y complejas. Función de reserva como energía, nuevas membranas y protección (ceras), estructura demembrana, hormonas.
CROMATOGRAFÍA EN CAPA FINA
El papel del cloroformo y el metanol, los lípidos se disuelven en el cloroformo y el metanol sirve para precipitar porque baja la constante dieléctricadel agua.
El baño de hielo es para evitar que dicho cloroformo se volatilice.
El volumen del filtrado = rendimiento del colesterol
El KCl es una sal y la utilizamos para realizar un “salting out”quedando así tres fases, siendo la última fase (cloroformo + lípidos) la que utilizamos.
Esquema representativo de la idea anterior, imaginar que son las fases contenidas en el tubo en el que se realizó laobtención de los lípidos antes de la cromatografía.
AGUA
KCl
CLOROFORMO + LÍPIDOS
Placas de silica
Los lípidos que se identificaron fueron los siguientes
Molibdato: 5 manchas de manifiesto, lípidosneutros no.
Bismuto: Grupo colina (buscar fórmula)
Ninhidrina: grupo amino
Yodo: dobles enlaces
DETERMINACIÓN DE COLESTEROL…
Lieberman-Burchard (lípidos en cloroformo): complejo entre los 2colesteroles que según la unión será el color del complejo ya sea azul o amarillo, la combinaciñon de ambos da el color verde que es el que se lee en el espectrofotómetro.
PARA SACAR LA CURVA TIPO
NOTA: Elvolumen de filtrado para los equipos que utilizamos el estándar de colesterol hecho por la profesora Lourdes se tomará como 4.5 ml, para aquellos que utilizaron el de el o los frascos color ámbar,debieron anotar el volumen de filtrado que venía en dichos recipientes.
La gráfica:
Absorbancia
Pb = abs
Colesterol (mg) o (µg) DEPREFERENCIA UTILIZAR mg
PARA CALCULAR EL RENDIMIENTO DE COLESTEROL
Usar una “regla de 3”
Cantidad de colesterol en mg del Pb ------------- 5µL o 0.005 ml
X...
INTEGRACIÓN 12 – 05 – 2015
Lípidos: Macromoléculas heterogéneas simples y complejas. Función de reserva como energía, nuevas membranas y protección (ceras), estructura demembrana, hormonas.
CROMATOGRAFÍA EN CAPA FINA
El papel del cloroformo y el metanol, los lípidos se disuelven en el cloroformo y el metanol sirve para precipitar porque baja la constante dieléctricadel agua.
El baño de hielo es para evitar que dicho cloroformo se volatilice.
El volumen del filtrado = rendimiento del colesterol
El KCl es una sal y la utilizamos para realizar un “salting out”quedando así tres fases, siendo la última fase (cloroformo + lípidos) la que utilizamos.
Esquema representativo de la idea anterior, imaginar que son las fases contenidas en el tubo en el que se realizó laobtención de los lípidos antes de la cromatografía.
AGUA
KCl
CLOROFORMO + LÍPIDOS
Placas de silica
Los lípidos que se identificaron fueron los siguientes
Molibdato: 5 manchas de manifiesto, lípidosneutros no.
Bismuto: Grupo colina (buscar fórmula)
Ninhidrina: grupo amino
Yodo: dobles enlaces
DETERMINACIÓN DE COLESTEROL…
Lieberman-Burchard (lípidos en cloroformo): complejo entre los 2colesteroles que según la unión será el color del complejo ya sea azul o amarillo, la combinaciñon de ambos da el color verde que es el que se lee en el espectrofotómetro.
PARA SACAR LA CURVA TIPO
NOTA: Elvolumen de filtrado para los equipos que utilizamos el estándar de colesterol hecho por la profesora Lourdes se tomará como 4.5 ml, para aquellos que utilizaron el de el o los frascos color ámbar,debieron anotar el volumen de filtrado que venía en dichos recipientes.
La gráfica:
Absorbancia
Pb = abs
Colesterol (mg) o (µg) DEPREFERENCIA UTILIZAR mg
PARA CALCULAR EL RENDIMIENTO DE COLESTEROL
Usar una “regla de 3”
Cantidad de colesterol en mg del Pb ------------- 5µL o 0.005 ml
X...
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