las batallas de arica















Antecedentes
La enfermedad de Alzheimer (AD) es un trastorno neurodegenerativo progresivo anormal caracterizado por depósito extracelular de péptido b-amiloide (Ab) y pérdida neuronal. Recientemente, hemos analizado la morfología de la sangre de los glóbulos rojos (RBC) de los sujetos con AD [ 1] y se reportaron que > 15% de los glóbulos rojos son alargados encomparación con el 5,9 % en controles normales (p < 0,0001 ). Esta observación sugiere posibles alteraciones en la estructura de la membrana de los RBC en sujettos con AD. Es probable que estos cambios se originan de las modificaciones causadas por las interacciones de Ab con glóbulos rojos [2,3] y/o a los cambios en el nivel de expresión de ciertas proteínas de RBC.
Es un hecho bien conocido Es unhecho bien conocido [4] que la superficie citoplásmica de la membrana del plasma contiene RBC bidimensional en malla de proteínas que se conoce como la membrana espectrina del citoesqueleto. Adjunto a las proteínas de la membrana integral, este citoesqueleto proporciona elasticidad,flexibilidad y















estabilidad de la colinesterasa, como el fluido continuo de las célulasa través del sistema circulatorio. El paso a través de los estrechos vasos sanguíneos y micro capilares implican grandes cambios en la tensión de corte y deformación significativa de la RBC. Debido a la facilidad para obtener glóbulos rojos y a la falta de organelas internas de RBC, la membrana plasmática de estas células se ha estudiado ampliamente. La identidad, función y topología de muchasRGB en proteínas de membrana se han determinado [ 4-6]. Una serie de proteínas asociadas al citoesqueleto de la RBC han demostrado la alteraración de la forma de glóbulos rojos. Por lo tanto, nuestra hipótesis fue que el aumento observado en los glóbulos rojos con una forma bicóncava de temas [ 1], se remontan a los cambios en el nivel de los componentes proteicos del citoesqueleto y las proteínasque une el citoesqueleto de la membrana.
Un reciente estudio publicado por Goodman [ 7], recompilando los datos proteómicos en las proteínas RBC se reunieron en los últimos cinco años por varios laboratorios. Estos estudios han identificado 751 proteínas dentro de los eritrocitos humanos, incluyendo alrededor de 340 proteínas
de membrana de Pasini en el 2006 [ 8]. Muchas de las proteínas se hademostrado que juegan un papel en la regulación de la forma y estabilidad de los RBC. Por lo tanto, hemos realizado un análisis proteómico de las proteínas en la membrana de los RBC en AD de los sujetos, y sus controles emparejados, para ver si podemos explicar los cambios de RBC en sujetos con AD [ 1], y para determinar si la membrana proteómica de RBC refleja los cambios en el nivel deproteínas relacionadas con la patología en AD.
Resultados y Discusión
LC-MS-MS información de RBC en las proteínas de la membrana
Como se describe a continuación en la sección de métodos, en las membrana de las proteínas se preparan dos grupos de RBC (AD y los controles normales ) que consta de 5 temas de cada grupo. La agrupación de las muestras mostradas por el análisis estadístico [ 9] hadisminuido el ruido y , con ello, aumentó la determinación de la fiabilidad, esto se ha utilizado en un análisis proteómico de lavado broncoalveolar en proteínas [ 10]. Las proteínas de la membrana en el control y muestras colectivas de Alzheimer fueron aisladas en tres enfoques diferentes: (1) preparación del buffer de la membrana pH 7,4 seguido de solubilización con un 2 %SDS (1); (2) preparado de lamembrana en el pH 8,0 (el pH 8 minimiza el enlace de hemoglobina en la membrana ), seguida de la disolución con un 2 %SDS (Run 2) ; y (3) preparación del buffer en la membrana pH 7.4 seguido por la solubilización con la extracción de SIGMA Reactivo Proteína Tipo 4 (normalmente se utiliza para electroforesis 2D, 3). Cada una de estas preparaciones de proteínas de membrana se resolvió mediante...