Levaduras

Universidad Nacional Autónoma de México
Facultad de Ciencias
Biología
Biología de la Célula II
Reporte Practica 5: Fermentación de la glucosa por la levadura de panificación

Por: Bucio Del Río Erándeni Itzhé Fecha de entrega: 15/X/2015

Introducción
La glucolisis es una ruta central; casi universal del catabolismo de la glucosa. En los organismos aeróbicossolo constituye la primera fase de la degradación aeróbica completa de la glucosa C2 y H2O.Son tres las rutas importantes que de seguir el piruvato después de la glucolisis 1(Lehninger, 1989):
La primera ruta es que el piruvato así formado se oxida en forma de CO2 y origina el grupo acetilo de acetil-coenzima A. Posteriormente el grupo acetilo se oxida por completo a CO2 y H2O en el ciclo del ácidocítrico, con intervención de oxigeno molecular.
La segunda es en la que se reduzca a lactato solo en condiciones anaeróbicas como el músculo o en los microorganismos que efectúan la fermentación a ácido láctico.
La tercera ruta principal del piruvato conduce al etanol. En este caso el piruvato formado a partir de la glucosa en la glucolisis se convierte anaeróbicamente en etanol y CO2, este procesoes llamado fermentación alcohólica.(Imagen 1)

Imagen 1. Fermentacion alcohólica
En algunos microorganismos como las levaduras se llevan a cabo la fermentación alcohólica, este es el caso de Sacarommise, que es un hongo unicelular, del grupo de los ascomicetos, en la naturaleza se encuentra sobre sustratos ricos en azúcares o en los exudados y savias dulces de algunas plantas (Bentley JP,1990).
En la industria se prefiere por la producción de etanol y debido a que es un microorganismo eficiente en la fermentación. Este hecho ha permitido la selección de cepas industriales con modificaciones y rasgos adquiridos que las hacen las productoras de etanol superiores (Garay- Arroyo et al; 2004).
Para observar cómo se lleva la oxidación del azúcar se ocupan indicadores que permiten observarcómo se está llevando a cabo la oxidación o la reducción y se les conoce como indicadores redox, estos presentan un color bien definido en cada uno de sus estados de oxidación. Se utilizan en reacciones que no son coloridas y se emplean en pequeñas cantidades. Algunos pueden ser Azul de Metileno, Difenillamin-Sulfato de Bario, Nitro-Ferroina, Tionina, Ferroina o el 2-6- diclorofenol-indofenol(Campillo, 2011) (Imagen 2).
Imagen 2. Estructura del 2-6 -diclorofenol-indofenol en su forma oxidada y reducida

En la actualidad existe una gran variedad de técnicas a disposición con las que se puede cuantificar el contenido de etanol y van desde las más sencillas como las reacciones colorimétricas y test mi crocristalinos, hasta los métodos instrumentales más sofisticados capaces de medirpropiedades físicas o químicas que permiten identificación y cuantificación del el alcohol etílico (Guerra Aranda, 2015 ). Un ejemplo de una prueba colorimétrica es el uso de la mezcla sulfocromica (dicromato de potasio y ácido sulfúrico) que oxida a los alcoholes primarios y secundarios hasta ácidos carboxílicos y cetonas, respectivamente, mientras que rara vez afectan a enlaces insaturados. (Freeman,2001)

Objetivos
Como objetivo general es observar la fermentación que realiza la levadura Saccharomyces y como partícula es el cuantificar la producción de C02 y determinar la presencia de etanol como producto final de la fermentación alcohólica de levaduras.

Planteamiento del problema e hipótesis
Si la fermentación indica la degradación anaeróbica de la glucosa entonces al medir al medir el CO2y la producción de alcohol observaremos que se lleva a cabo este fenómeno.


Metodología  
Para lograr los objetivos en la cuantificación de CO2; se comenzó pesando un gramo de levadura y la disolvimos homogéneamente procurando que no entre aire en 10 ml de la solución de glucosa al 5% en buffer de acetato, posteriormente le añadimos 1 ml de 2,6 diclorofenol-indofenol sódico (DCPIP); se...