Ligandos

Inmovilización de ligandos
La afinidad que tenga un ligando por algún afinante (muestra) específico es una consideración de enorme importancia para la correcta selección del ligando a inmovilizar.Una molécula puede ser utilizada como ligando siempre y cuando se una específica y reversiblemente a un afinante de interés. Al escoger un afinante se debe tener en cuenta la naturaleza de lainteracción afinante-ligando y la naturaleza del ligando mismo para saber si tiene o no (y cuantos) sitios potenciales para acoplar a la matriz así como la habilidad que pueda presentar bajo lascondiciones de acoplamiento.

Los ligandos de afinidad son biomoléculas unidas sobre el soporte del solido inerte, responsables de la adsorción especifica de soluto- analito. Estos se clasifican según sunaturaleza y según su actuación.
Naturaleza: pueden ser macromoléculas biológicas o bien moléculas de bajo peso molecular de biomoléculas pequeñas o macromoléculas bioquímicas, respectivamente.Actuación: Se fundamenta en la selectividad en la retención que condiciona las características de la cromatografía de afinidad; distinguiéndose en estos dos grupos:
* Ligandos específicos, como losanticuerpos, que se enlazan reversiblemente a un solo soluto.
* Ligandos generales enlazados con un determinado grupo de compuestos bioquímicos, como las lectinas y nucleótidos.
Las matrices osoportes cuya superficie se establece el enlace covalente con el ligando de afinidad debe cumplir con ciertos requisitos para poder obtener el producto con menos dificultad y mayor grado de pureza,estos son:
* Gran superficie, refiriéndose a aquella área que se encuentra en contacto directo con la molécula que se desea aislar, está directamente relacionada con la cantidad de afinante que sedesea aislar, por lo tanto entre mayor sea el área específica de la columna se esperará purificar mayor cantidad de afinante.
* Tamaño del grano controlable
* Porosidad controlable, para...