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Laboratorio Nº 4: Enzimología I
INTRODUCCIÓN
Las enzimas son biocatalizadores proteicos esenciales para mantener los procesos metabólicos a velocidades compatibles con la vida, contribuyendo ademása su regulación. Debido a su naturaleza proteica las enzimas pueden modificar su actividad por cambios de temperatura y pH, factores que pueden alterar su estructura molecular, provocando sudesnaturalización. En general una reacción química aumenta su velocidad de reacción al aumentar la temperatura, pero en el caso de las reacciones catalizadas por enzimas (en Humanos), este efecto se observasólo entre 35 y 40 ºC, ya que a temperaturas mayores la enzima se desnaturaliza debido a la ruptura de enlaces débiles, principalmente puentes de hidrógeno y la pérdida de su conformación nativa.Existen otros casos, por ejemplo las bacterias termófilas, en las cuales las enzimas pueden funcionar hasta 100° C
Debido también a su naturaleza proteica la enzima presenta numerosos grupos ionizables,los que derivan de los radicales de sus aminoácidos constituyentes. Las alteraciones del pH pueden cambiar el grado de ionización de los grupos químicos involucrados en el sitio activo de la enzima,afectando su actividad catalítica.
Las enzimas son activas en un rango estrecho de pH, con una actividad máxima a un valor de pH denominado pH óptimo. Por tal motivo la actividad enzimática se mide enpresencia de tampones o amortiguadores de pH.
OBJETIVOS
Estas actividades prácticas tienen como objetivo que los alumnos
1. Se familiaricen con los procedimientos de laboratorio para manipularmuestras biológicas.
2. Conozcan algunos procedimientos para determinar la actividad de una enzima en muestras biológicas.
3. Comprueben el efecto que tiene en la actividad de una enzima las variacionesde pH y temperatura.
ACTIVIDADES
Objetivo: Estudiar el efecto de las variaciones de pH y temperatura sobre la actividad de la amilasa salival.
La amilasa salival es una enzima que rompe...