Métodos virología parte 1 2 3

“Métodos de estudio
en virología”

UNIVERSIDAD AUTÓNOMA
DE CHIHUAHUA
Facultad de Ciencias
Químicas

M.C. Ana Bertha Torres Reyes

Integrantes:
Ivette Anahí Arámbula Vázquez 265228
Ismael Esparza Trujillo 257538
María Isabel Rodríguez Salgado 257541

Cultivos celulares
Un cultivo celular se obtiene induciendo el crecimiento
de células provenientes de un órgano o tejido de un
animal experimental.Cultivo en animales de laboratorio
Fueron el primer método
de cultivo de los virus y
durante años el único,
actualmente juegan un
papel menor en el
diagnóstico de
laboratorio, sin embargo
se siguen utilizando
ratones lactantes para el
aislamiento de
rhabdovirus como el virus
de la rabia, flavivirus y
togavirus

Cultivo en embrión de pollo
Los embriones de pollo
representan un método
sensiblepara el
aislamiento viral, son
muy utilizados como
fuente para el
aislamiento de virus
aviares; tienen la ventaja
para propagar el virus
para la inoculación en
diversos hospedadores
animales, esta técnica es
importante para la
identificación y
diferenciación de virus
desconocidos

Inoculación en saco vitelino

Inoculación por saco alantoideo

Tipos de cultivo celular
 
Actualmente se entiendepor cultivo celular al conjunto
de técnicas que permiten el mantenimiento de las
células 'in vitro', manteniendo al máximo sus
propiedades fisiológicas, bioquímicas y genéticas. Se
distinguen varios tipos de cultivos celulares.

Cultivo de órganos
 Se

coloca el órgano sobre una rejilla situada en la
interfase líquido-gas de un medio del que obtiene los
nutrientes y al que puede liberar losdesechos.
 Este tipo de cultivo permite mantener, al menos en
parte, la arquitectura característica del tejido “in vivo”.
 Se conservan las interacciones histológicas y, gracias a
ello, este tipo de cultivo permite mantener los tipos
celulares diferenciados, por lo que representan una
buena réplica del tejido de origen.

Explantes primarios
 Se

coloca un fragmento de tejido o de órgano en lainterfase sólido-líquido de un soporte de vidrio o de
plástico.
 Las células se adhieren a la superficie y las células de
la periferia del explante pueden migrar y proliferar por
la superficie del soporte.

Cultivo celular primario
 Es

el tipo de cultivo más utilizado. Se puede obtener a
partir de explantes primarios o de suspensiones de
células disgregadas.
 La disgregación celular se realiza pormétodos
enzimáticos o mecánicos.
 En estos cultivos se pierden las interacciones célulacélula y las interacciones de la célula con la matriz
extracelular.

Existen dos tipos de cultivo celular
primario:
 
• Cultivos en monocapa: las células crecen adheridas sobre
un soporte sólido (plástico o vidrio). El anclaje al sustrato es un
prerrequisito para la proliferación
celular.
• Cultivos ensuspensión: las células se encuentran dispersas
en el medio de cultivo. Este tipo de cultivo se restringe a las
células hematopoyéticas, células madre, líneas celulares
transformadas y células tumorales.

Efecto citopatogenico
(Cuerpos de inclusión, Muerte celular, Fusion celular)
Cambios morfológicos visibles en células infestadas con virus.
paralización del ARN celular y de la síntesis de proteínas.• Fusión celular.
• Liberación de enzimas lisosomales.
• Cambios en la permeabilidad de las membranas celulares.
• Cambios difusos de las estructuras intracelulares.
• Presencia de cuerpos de inclusión virales
• Aberraciones cromosómicas.
Excluye la transformación maligna, que es la TRANSFORMACIÓN
CELULAR, VIRAL

Entre los cambios citopáticos en la células
se encuentran los siguientes:
DEGENERACION
 CORPUSCULO
 FUSION

CELULAR
 INCORPORACION DE ANTIGENOS A LA
MEMBRANA PLASMÁTICA
 MUERTE CELULAR

RADIOINMUNOENSAYO (RIA)
Se utiliza para detectar y cuantificar sustancias que se
encuentran en cantidades muy pequeñas y mezcladas
con muchas otras. Es por tanto una técnica muy sensible
y muy específica. Utilizando anticuerpos de gran
afinidad se pueden detectar hasta picogramos de...