Métodos Y Técnicas De Estudio Celular

Departamento de Recursos Naturales y Medio Ambiente.

DIVERSIDAD CELULAR - MÉTODOS Y TÉCNICAS DE ESTUDIO CELULAR Introducción La morfología y tamaños celulares son muy variados. Algunas célulassontan pequeñas que están fuera de resolución del microscopio de luz, pero hay otras que pueden tener un diámetro de varios milímetros. Existen formas esféricas, ovales, estrelladas, aplanadas, cúbicas,cilíndricas, piriformes, etc. Algunas células presentan un núcleo (mononucleadas), pero existen algunas como por ejemplo las fibras musculares estriadas que presentan varios núcleos al igual que los osteoclastos. Por otro lado, los glóbulos rojos adultos de los mamíferos pierden su núcleo antes de salir del torrente sanguíneo. Además, bacterias y algas verdes azules no tienen un núcleo limitado pormembrana nuclear. Conociendo la íntima relación entre forma y función, encontraremos mayor diversidad celular si analizamos las distintas especializaciones funcionales que ellas presentan en su superficie y en su interior. La célula es la unidad anatómica-funcional de los seres vivos. El conocimiento de su estructura, nivel de organización y funcionamiento proviene por un lado del desarrollo dela microscopia óptica y electrónica (y las técnicas asociadas a ellas) y por el otro de los estudios bioquímicos que, desde los primeros aislamientos de los componentes celulares, llegaron en su expresión más acabada al conocimiento de los mecanismos de funcionamiento a nivel molecular derivando en lo que hoy se conoce como Biología Molecular. La limitante en el estudio de la estructura yfuncionamiento de la célula y de sus partes integrantes son principalmente, el tamaño, ya que se encuentran bajo el límite de resolución del ojo humano, y su transparencia. Sin embargo, gracias a la microscopia óptica y electrónica las cuales proporcionan un alto poder de aumento y de resolución permiten una mayor definición de las estructuras celulares. Por otro lado, los estudios bioquímicos hanpermitido analizar tanto la composición química y la función de los diferentes componentes celulares. Observación de estructuras biológicas en el microscopio En la actualidad existe una gran diversidad de microscopios y técnicas para observar las estructuras biológicas. La utilización de cada una de ellas depende del objetivo que se persiga.

La morfología celular puede estudiarse utilizando dosmétodos: examen inmediato y examen mediato. 1.Examen Inmediato

Este tipo de examen consiste en la observación del material (célula o tejido) aislado, al estado viviente. El examen inmediato puede realizarse al estado fresco (sin utilizar reactivos modificadores) o por tratamiento previo con líquidos adicionales o colorantes vitales. Estos colorantes pueden ser colorantes vitales, es decir sustanciasno tóxicas para la célula o colorantes post- vitales, las cuales matan las células luego de la tinción. Observación al estado fresco. Es el método más simple, de fácil uso, que permite apreciar exactamente la morfología y los movimientos. Su aplicación está restringida, ya que se deben usar materiales delgados y transparentes, no permite realizar observaciones muy prolongadas y muestra pocosdetalles de estructura. Algunas veces se debe emplear líquidos fisiológicos (solución Ringer - líquido de Tyrode) para mantener vivas a las células. Si la observación debe ser prolongada, conviene recurrir a la cámara húmeda, que consiste en un porta grueso con una excavación en el centro sobre la que se invierte un cubre con una gota de líquido fisiológico, en el que se suspendió el material aexaminar. Observación con tratamiento previo con líquidos adicionales. Se puede considerar una técnica intermedia entre el examen mediato y el inmediato, ya que consiste en el uso de líquidos que modifican las propiedades ópticas de las células. Por ejemplo una mezcla de alcohol-agua-glicerina, ácido acético, etc. Observación con colorantes vitales. Se hace uso de estos colorantes con el objeto de...