Manual de inmunologia

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FACULTAD DE QUÍMICA
DEPARTAMENTO DE BIOLOGÍA

SECCIÓN DE BIOLOGÍA

MANUAL DE PRÁCTICAS
LABORATORIO DE
INMUNOLOGÍA GENERAL

Saturnino de León Chapa
Patricia Elvira Berrón Ruíz
Rosana Pelayo Camacho

Magdalena Acosta Segura
Rodolfo Pastelín Palacios
Fernando García Tamayo

Junio de 2003

PRÓLOGO
InmunologíaGeneral representa una de las asignaturas teórico-prácticas que
resultan trascendentales para los estudiantes de la carrera de Química
Farmacéutico-Biológica, por cuanto que sienta las bases de una formación sólida
que permite el adecuado desempeño en el campo de la salud, a través del uso y/o
el diseño de metodologías diagnósticas, preventivas y terapéuticas que incluyen
elevados índicesde confiabilidad, sensibilidad y especificidad.
Si bien se trata de una disciplina en la que los avances científicos progresan a
ritmos especialmente acelerados, el curso práctico de esta materia cubre con
evidente eficacia su objetivo general de enseñar las técnicas y fundamentos
“claves”. Esto último se refleja claramente en el hecho de que los alumnos
mantienen un creciente interés porconocer y profundizar en relación con los
nuevos hallazgos, aspecto esencial para lograr su permanente actualización.
El presente manual contiene los principales fundamentos y técnicas asociados a
los ejercicios que se realizan hoy en día en el laboratorio de Inmunología General,
lo que sin duda representará un gran apoyo para los estudiantes. Lógicamente,
como cualquier texto sobreInmunología, éste es perfectible y deberá ser
modificado y ajustado continuamente, tal como lo han afirmado en forma reiterada
los docentes del curso.
Expreso mi mayor reconocimiento a los autores de esta gran obra, los profesores
Saturnino de León Chapa, Patricia E. Barrón Ruiz, Rosana Pelayo Camacho,
Magdalena Acosta Segura, Fernando García Tamayo y Rodolfo Pastelín Palacios,
y dicha manifestación derespeto académico también la hago extensiva a los
profesores Ma. Guadalupe Reyes García, Luisa Constanza del R. Cervantes
Barragán, Marco Velasco Velázquez y Constantino III R. López Macías quienes,
mostrando un ejemplar espíritu de equipo, contribuyeron con los autores
realizando diversas y muy valiosas aportaciones.

Raúl Garza Velasco
Jefe del Departamento de Biología

1

Í N D IC E
UNIDAD 1. INMUNÓGENOS, ANTÍGENOS E INDUCCIÓN DE LA RESPUESTA
INMUNE
1.

2.

Preparación de inmunógenos y antígenos.
I. Extracto de tejido muscular o proteínas plasmáticas de origen
humano, equino, bovino, porcino, de pollo, de perro, etc.
II. Proteínas purificadas.
Albúmina y γ-globulina humana
III. Preparación de antígenos e inmunógenos celulares.
Glóbulos rojos de carnero.
IV.Preparación de antígenos e inmunógenos bacterianos.
Antígenos OK-L de Escherichia coli.
Antígenos de Shigella dysenteriae.
Antígenos totales de B. abortus.
Antígeno somático (O) de Salmonella 9,12,d,Vi (serotipo Typhi).
Antígeno flagelar (H) de Salmonella 9,12,d,Vi (serotipo Typhi).

4
6

Inmunización de animales de laboratorio.
Sueros antiespecie.
Sueros anti-proteínas purificadas.Suero anti-eritrocitos de carnero (Amboceptor hemolítico anti-carnero).
Sueros antibacterianos.

21

9
11
13

UNIDAD 2. INTERACCIONES ANTÍGENO-ANTICUERPO (Ag-Ac)
INMUNOPRECIPITACION

28

3.

Curva de precipitación cuantitativa en capilar.

33

4.

Mezcla de antígeno y anticuerpo.
Prueba de Identidad a sueros de uso terapéutico.
Determinación del origen de manchas desangre.

36

5.

Doble difusión en placa (Ouchterlony)
Identificación de fracciones antigénicas presentes en suero humano.

38

6.

Inmunodifusión radial simple (RID). (Mancini, Carbonara y Hermans) 41
Cuantificación de albúmina sérica humana (ASH).

7.

Inmunoelectroforesis (IEF). (Grabar y Williams)
Análisis de proteínas en Suero Humano.

UNIDAD 3. REACCIONES DE AGLUTINACIÓN...