manual inmunologia

BENÉMERITA UNIVERSIDAD AUTÓNOMA DE PUEBLA
FACULTAD DE CIENCIAS QUÍMICAS
LICENCIATURA: QUÍMICO FARMACOBIÓLOGO
DEPARTAMENTO DE MICROBIOLOGÍA

MANUAL DE LABORATORIO DE
INMUNOLOGÍA

AUTORES:
M. en C. JUAN CARLOS BENITEZ SERRANO
M.S.P. CARLOS CABRERA MALDONADO
M. en C. ALMA LOPEZ GARCÍA
M. en C. LAURA MARTINEZ PEREZ
M. en C. NIDIA GARY PASOS SALAZAR
M. en C. OSCAR PEREZ TORIZ
M. en C.ALEJANDRO CESAR RUIZ TAGLE
2013
1

INDICE

NÚMERO DE LA
PRÁCTICA

TITULO DE LA PRÁCTICA

PÁGINA

Práctica 1

Diluciones

3

Práctica 2

Toma de muestra

7

Práctica 3

Observación de leucocitos (cuenta diferencial)

10

Práctica 4

Determinación de grupo sanguíneo

12

Práctica 5

15

Práctica 6

Determinación del título de anticuerpos ABO del
suero.Pruebas cruzadas

Práctica 7

Diagnóstico serológico de infecciones bacterianas

20

17

(Reacciones febriles)
Práctica 8

Diagnóstico serológico de sífilis

23

Práctica 9

Factor reumatoide

27

Práctica 10

Proteína C reactiva

29

Práctica 11

Determinación de antiestreptolisinas

31

Práctica 12

Determinación de la hormona gonadotropina

34

coriónicahumana
Bibliografía

36

2

BENÉMERITA UNIVERSIDAD AUTÓNOMA DE PUEBLA
FACULTAD DE CIENCIAS QUÍMICAS
LICENCIATURA: QUÍMICO FARMACOBIÓLOGO
DEPARTAMENTO DE MICROBIOLOGÍA

PRÁCTICA No. 1
DILUCIONES
Introducción

Se les llama diluciones a las soluciones con concentración menor obtenidas al agregar
volúmenes conocidos de diluyente a una solución de concentración conocida. Las dilucionesse expresan en forma de una proporción, por ejemplo 1/10 (1:10) donde la primera cifra o
numerador (1) corresponde al volumen de lo que se está diluyendo y la segunda cifra o
denominador (10) al volumen total en que se encuentra.

Objetivo
Aprenderá a calcular diluciones en forma directa o en serie.

Desarrollo
Así, una dilución 1/10 indica que se tiene un volumen de la solución originalcontenido o
diluido en 10 volúmenes totales, de los cuales 9 corresponden al diluyente. Dado que en una
dilución lo que se indica es la relación entre el volumen de la solución original y el volumen
total en que se encuentra, una dilución 1/10 puede prepararse de diferentes maneras:

Por ejemplo:
1 mL de muestra en 9 mL de diluyente
0.1 mL de muestra en 0.9 mL de diluyente
0.5 mL demuestra en 4.5 mL de diluyente

En la práctica el cálculo de las diluciones se puede efectuar de dos maneras diferentes
que cumplen ciertas expectativas, la dilución directa y la dilución en serie.

3

Dilución directa.
Para realizar una dilución directa se puede hacer uso de la siguiente expresión:

1/d=Vm/Vt

donde 1/d= dilución
Vm= volumen de muestra
Vt= volumen total (volumen dediluyente + volumen de muestra)

Ejemplo N°1
Lleve 5 mL de muestra a una dilución 1/10.
Sustituyendo los valores conocidos tenemos:
1/d=1/10
Vm=5 mL
Vt= ?

Así:

1/10=5 mL/Vt
despejando Vt tenemos que Vt=10 x 5/1=50 mL
volumen de diluyente = volumen total-volumen de muestra
volumen de muestra = 50-5 = 45 mL

Ejemplo N°2
Prepare exactamente 200 mL de una dilución 1/50.
Sustituyendolos valores conocidos tenemos:
1/d=1/50
Vm=?
Vt= 200 mL

Así:

1/50=Vm/200
Despejando Vm tenemos que Vm=200 x 1/50=4 mL
Volumen de diluyente = volumen total-volumen de muestra
Volumen de diluyente = 200-4=196 mL
4

Sin embargo, las diluciones directas tienen el inconveniente de que cuando es
necesario hacer una dilución alta por ejemplo 1/ 10 000, se desperdicia mucho reactivo o seincurre en un error de medición. Así, una dilución 1/ 10 000 se prepararía con 1 mL de
muestra y 9 999 mL de diluyente o bien 9.999 mL de diluyente y 0.001 mL de muestra.

Dilución seriada

Este tipo de dilución soluciona los inconvenientes que presenta el cálculo directo de
las diluciones altas. Además, en microbiología permite el cálculo de la población microbiana
en la muestra de...