Matriz

Cuarta parte

Ensayos aplicables
a más de una matriz

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Ensayo de toxicidad aguda
con la bacteria Vibrio fischeri
(Photobacterium phosphoreum)
Yolanda Pica Granados y Gissel Trujillo Domínguez

C lasificación

del ensayo :

AE

Principio de la prueba
Vibrio fischeri es una bacteria marina luminiscente, gram-negativa, anaerobia
facultativa. En condiciones ambientalesfavorables estas bacterias emiten luz
naturalmente, requiriendo para esto oxígeno en concentraciones por encima
de 0.5 mg/L.
El empleo de estas bacterias con fines de monitoreo de la contaminación
ambiental se inició en los años 60 y hacia los años 70 se emplearon en la determinación de toxicidad en aguas, sedimentos y productos diversos. Posteriormente, estos métodos fueron estandarizados eincluidos como protocolos
normalizados como DIN (norma 38412 parte 34), ISO (norma 11348 parte 1
y SCOFI (NOM NMX-AA-112) en México.
La prueba se basa en la medición de la luminiscencia emitida por las bacterias
V. fischeri después de su exposición a una muestra problema por un período
307

Amplia experiencia

Prueba de toxicidad aguda con Vibrio fischeri

308 Ensayos aplicables a más de unamatriz

de 5 a 30 minutos. La intensidad de la luz emitida por las bacterias expuestas a
la muestra problema se compara con la emitida por bacterias que permanecen
en las condiciones óptimas del sistema control.
Ante la presencia de sustancias tóxicas, la luminiscencia de V. fischeri disminuye de forma proporcional a la carga tóxica en la muestra problema. Este
decaimiento se produce comoresultado del daño ocasionado a los procesos
metabólicos asociados con la respiración bacteriana.
Este ensayo es aplicable en estudios de toxicología acuática; control legal de
descargas agrícolas, industriales y municipales; evaluación de procesos de tratamiento y estudios integrales de contaminación, donde para el análisis de toxicidad
se requiera manejar una concentración inicial de lamuestra del 100%. Este método
puede emplearse también para el análisis de extractos orgánicos y elutriados de
suelos y sedimentos o sustancias puras líquidas o sólidos solubilizables.

Definiciones
Las siguientes definiciones han sido adecuadas a las necesidades de la prueba.
Agua deionizada: es el agua a la que se le han removido los iones en solución,
pasándola a través de columnas de resina ode un sistema de ósmosis inversa.
Análisis replicado: es la prueba realizada a una muestra en dos o más ocasiones
durante la misma sesión de trabajo.
Bioluminiscencia: fenómeno en donde los organismos vivos emiten luz como
resultado de procesos enzimáticos ligados a la respiración.
Blanco: es usado indistintamente con la palabra control.
Blanco de pretratamiento: deberá entenderse comoblanco de pretratamiento
aquel que se prepara de la misma forma que las muestras, pero sin contener
a la muestra. Se realiza cuando las muestras son tratadas previamente al
análisis de toxicidad y se elabora para evaluar en qué medida el pretratamiento contribuye a la toxicidad de la muestra.
Compuesto tóxico de referencia: sustancia pura utilizada en ensayos de toxicidad
para determinar lasensibilidad de los organismos de prueba y validar las
mediciones de toxicidad.
Concentración efectiva media (CE50): es la concentración estimada de material que causa un efecto no letal detectado por la reducción del 50% de la
intensidad luminosa generada por una población de 106 bacterias.
Control: lote o tratamiento dentro de un diseño experimental que replica todos

Prueba de toxicidad agudacon Vibrio fischeri

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los factores que puedan afectar el resultado, excepto la condición que está
siendo investigada (sinónimo de control negativo).
Cultivo: conjunto de plantas o animales que se mantienen bajo condiciones
definidas y controladas, para producir organismos saludables.
Efecto tóxico agudo: es aquel que es inducido y observado en un período corto, que
puede ser de 5 a...