Medios de cultivo para microorganismos que digieren macromoleculas
Páginas: 7 (1589 palabras)
Publicado: 31 de marzo de 2014
Medio
Fundamento
Indicador de los medios
Reactivos
Observación
Agar Citrato de Simmons
En el medio de cultivo, el fosfato monoamónico es la única fuente de nitrógeno y el citrato de sodio es la única fuente de carbono.
Las sales de fosfato forman un sistema buffer, el magnesio es cofactor enzimático. El cloruro de sodio mantiene el balance osmótico, el azul de bromotimol es elindicador de pH, que vira al color azul en medio alcalino y el agar es el agente solidificante.
El medio de cultivo es diferencial en base a que los microorganismos capaces de utilizar citrato como única fuente de carbono usan sales de amonio como única fuente de nitrógeno, con la consiguiente producción de alcalinidad.
El metabolismo del citrato se realiza, en aquellas bacterias poseedoras decitrato permeasa, a través del ciclo del ácido tricarboxílico.
El desdoblamiento del citrato genera progresivamente, oxalacetato y piruvato. Este último, en presencia de un medio alcalino, da origen a ácidos orgánicos que al ser utilizados como frente de carbono, producen carbonatos y bicarbonatos alcalinos. El medio entonces
vira al azul y esto es indicativo de la producción de citrato permeasa.azul de bromotimol
Citrato de sodio
Cloruro de sodio
Fosfato dipotásico
Fosfato monoamónico
Sulfato de magnesio.
Azul de bromotimol
Agar
Positivo: crecimiento bacteriano con un intenso color azul en el pico de flauta.
Negativo: ausencia de crecimiento y permanencia del color verde del medio de cultivo
Caldo Rojo de Metilo-Voges Proskauer
En el medio de cultivo, la pluripeptonaaporta los nutrientes necesarios para el desarrollo bacteriano y la glucosa es el hidrato de carbono fermentable.
La glucosa puede ser metabolizada por los microorganismos, a través de distintas vías metabólicas. Según la vía utilizada, se originarán productos finales ácidos (ácido láctico, ácido acético, ácido fórmico), o productos finales neutros (acetil metil carbinol).
Esta diferencia en elmetabolismo bacteriano, podría ser reconocida por la adición de un indicador como rojo de metilo, para revelar la presencia de productos ácidos, y por la adición de alfa naftol e hidróxido de potasio para evidenciar la presencia de productos finales neutros.
Voges y Proskauer, describieron una coloración rojiza que aparecía después de adicionar hidróxido de potasio a los cultivos de ciertosmicroorganismos en medio con glucosa. Esta coloración se debe a la oxidación del acetilmetil carbinol a diacetilo el cual reacciona con la peptona del medio para dar un color rojo.
rojo de metilo
Pluripeptona
Glucosa
Fosfato dipotásico
Revelado de pruebas bioquímicas
a-Prueba del rojo de metilo:
Añadir unas gotas de una solución de rojo de metilo al 0.04%, observar el color del medio.b-Prueba del Voges Proskauer:
Añadir 0,6 ml de alfa naftol al 5% en alcohol etílico absoluto y 0.2 ml de hidróxido de potasio al 40% a 2.5 ml de cultivo. Agitar vigorosamente el tubo, y dejar a temperatura ambiente durante 10-15 minutos. Observar el color de la superficie del medio.
Resultados
1-Prueba del rojo de metilo:
Positivo: color rojo.
Negativo: color amarillo.
2-Prueba deVoges Proskauer:
Positivo: desarrollo de un color rojo en pocos minutos después de una completa agitación del tubo.
Negativo: ausencia de color rojo.
Medio Kligler
En el medio de cultivo, la peptona de carne y la triproteína, aportan los nutrientes adecuados para el desarrollo bacteriano. La lactosa y la glucosa son los hidratos de carbono fermentables. El tiosulfato de sodio es el sustratonecesario para la producción de ácido sulfhídrico, el citrato de hierro y amonio, es la fuente de iones Fe3+, los cuales se combinan con el ácido sulfhídrico y producen sulfuro de hierro, de color negro. El rojo de fenol es el indicador de pH, y el cloruro de sodio mantiene el balance osmótico.
Por fermentación de azúcares se producen ácidos que se detectan por medio del indicador rojo de...
Fundamento
Indicador de los medios
Reactivos
Observación
Agar Citrato de Simmons
En el medio de cultivo, el fosfato monoamónico es la única fuente de nitrógeno y el citrato de sodio es la única fuente de carbono.
Las sales de fosfato forman un sistema buffer, el magnesio es cofactor enzimático. El cloruro de sodio mantiene el balance osmótico, el azul de bromotimol es elindicador de pH, que vira al color azul en medio alcalino y el agar es el agente solidificante.
El medio de cultivo es diferencial en base a que los microorganismos capaces de utilizar citrato como única fuente de carbono usan sales de amonio como única fuente de nitrógeno, con la consiguiente producción de alcalinidad.
El metabolismo del citrato se realiza, en aquellas bacterias poseedoras decitrato permeasa, a través del ciclo del ácido tricarboxílico.
El desdoblamiento del citrato genera progresivamente, oxalacetato y piruvato. Este último, en presencia de un medio alcalino, da origen a ácidos orgánicos que al ser utilizados como frente de carbono, producen carbonatos y bicarbonatos alcalinos. El medio entonces
vira al azul y esto es indicativo de la producción de citrato permeasa.azul de bromotimol
Citrato de sodio
Cloruro de sodio
Fosfato dipotásico
Fosfato monoamónico
Sulfato de magnesio.
Azul de bromotimol
Agar
Positivo: crecimiento bacteriano con un intenso color azul en el pico de flauta.
Negativo: ausencia de crecimiento y permanencia del color verde del medio de cultivo
Caldo Rojo de Metilo-Voges Proskauer
En el medio de cultivo, la pluripeptonaaporta los nutrientes necesarios para el desarrollo bacteriano y la glucosa es el hidrato de carbono fermentable.
La glucosa puede ser metabolizada por los microorganismos, a través de distintas vías metabólicas. Según la vía utilizada, se originarán productos finales ácidos (ácido láctico, ácido acético, ácido fórmico), o productos finales neutros (acetil metil carbinol).
Esta diferencia en elmetabolismo bacteriano, podría ser reconocida por la adición de un indicador como rojo de metilo, para revelar la presencia de productos ácidos, y por la adición de alfa naftol e hidróxido de potasio para evidenciar la presencia de productos finales neutros.
Voges y Proskauer, describieron una coloración rojiza que aparecía después de adicionar hidróxido de potasio a los cultivos de ciertosmicroorganismos en medio con glucosa. Esta coloración se debe a la oxidación del acetilmetil carbinol a diacetilo el cual reacciona con la peptona del medio para dar un color rojo.
rojo de metilo
Pluripeptona
Glucosa
Fosfato dipotásico
Revelado de pruebas bioquímicas
a-Prueba del rojo de metilo:
Añadir unas gotas de una solución de rojo de metilo al 0.04%, observar el color del medio.b-Prueba del Voges Proskauer:
Añadir 0,6 ml de alfa naftol al 5% en alcohol etílico absoluto y 0.2 ml de hidróxido de potasio al 40% a 2.5 ml de cultivo. Agitar vigorosamente el tubo, y dejar a temperatura ambiente durante 10-15 minutos. Observar el color de la superficie del medio.
Resultados
1-Prueba del rojo de metilo:
Positivo: color rojo.
Negativo: color amarillo.
2-Prueba deVoges Proskauer:
Positivo: desarrollo de un color rojo en pocos minutos después de una completa agitación del tubo.
Negativo: ausencia de color rojo.
Medio Kligler
En el medio de cultivo, la peptona de carne y la triproteína, aportan los nutrientes adecuados para el desarrollo bacteriano. La lactosa y la glucosa son los hidratos de carbono fermentables. El tiosulfato de sodio es el sustratonecesario para la producción de ácido sulfhídrico, el citrato de hierro y amonio, es la fuente de iones Fe3+, los cuales se combinan con el ácido sulfhídrico y producen sulfuro de hierro, de color negro. El rojo de fenol es el indicador de pH, y el cloruro de sodio mantiene el balance osmótico.
Por fermentación de azúcares se producen ácidos que se detectan por medio del indicador rojo de...
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