Metodología para realizar cromatografía en columna

I.- RESUMEN
En los cloroplastos existen una variedad de pigmentos que no se ven a simple vista, y que se pueden obtener a través del método de cromatografía en columna. En la presente investigaciónse aplicara este método a tejido de Spinacia oleracea.
Este tejido, obtenido de hojas, es machacado y mezclado con éter de petróleo, formando una solución concentrada. Esta es limpiada y purificadaal ser mezclada repetidas veces con NaCl al 10%, quedando un extracto puro de pigmentos.
Es a este extracto al cual se le van a separar los componentes en la columna. Para realizar esto, se debeprimero colocar algodón en el fondo de la columna y agregar éter de petróleo, para formar lo que será al fase estacionaria. Seguido a esto se agrega el extracto de pigmentos disuelto en 0.5 éter depetróleo. Luego de esto se agrega éter de petróleo al 0.5% en n-propanol, compuesto que teóricamente empezara la precipitación de los pigmentos.
Este montaje debe ser puesto a prueba, y si no tiene ningúnerror, llevarlo a cabo y obtener los resultados de experimento, que posteriormente servirán para corroborar la validez de la hipótesis, además de alcanzar los objetivos trazados en el pre informe.II.- METODOLOGIA
Con el fin de lograr el objetivo general y los objetivos específicos propuestos en el pre informe, se hará un montaje experimental, el cual será una cromatografía en columna, para laobtención de pigmentos fotosintéticos en hojas de espinaca (Spinacia oleracea). En las páginas que siguen se procederá a explicar el procedimiento del montaje experimental, y a explicar sus partes. Lacromatografía en columna es un método en el cual se separan las partículas constituyentes de una sustancia a través de los distintos valores de solubilidad que tienen con las fases. Estas fases estánen equilibrio1.
La cromatografía en columna de hojas de Spinacia oleracea puede ser separada en dos procedimientos, en los cuales se necesitan los siguientes materiales, reactivos y equipo:
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